Interaction between organisms in yet-uncultured bacterial community.

尚未培养的细菌群落中生物体之间的相互作用。

• 批准号: 21K06342
• 负责人: 雪 真弘
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06342/
• 关键词: シロアリ腸内細菌叢; 乳酸菌; 共生; 生物間相互作用; 難培養微生物

動物の腸内には、多種多様な微生物種が共生しており、それらが相互作用することで、代謝物質などの物質循環を行なっている。現在、複雑な微生物叢の解析においては、メタゲノム解析が主流であるため、個々の微生物の腸内微生物叢での相互作用を直接調べることは困難であり、推察の域を出ない。本研究では、解析対象であるシロアリ腸内細菌種のみをコントロールすることにより、その細菌種がどのように他細菌種と相互作用し、共生系でどのような役割を担っているのか等、腸内での実際の振る舞いを解明する。本研究では、モデルケースとして還元的酢酸生成細菌に必須の葉酸を供給している可能性がある乳酸菌を誘導死する遺伝子組換え体を作製し、腸内微生物叢から乳酸菌のみを取り除いた際の影響を調べ、これまで困難であった難培養微生物間の相互作用を解明することを目的とする。ヤマトシロアリ腸内より単離した乳酸菌Lactococcus reticulitermitis JCM 32106に致死遺伝子を挿入した遺伝子組換え株の作製を試みた。まず、L. reticulitermitisの乳酸菌タンパク質発現ベクターpNZを用いた形質転換系の確立を目指した。エレクトロポレーション法によるベクターの導入法の検討を行なった。各種条件を変更し検討を行なったが、現在まで効率的な形質転換株の取得法の確立には至っていたない。乳酸菌の実験と並行してヤマトシロアリから単離されたEnterobacter sp. に関しても、形質転換株の作製法の確立を目指した。緑色蛍光タンパク質GFPを組み込んだpETベクターを用い、エレクトロポレーション法、ヒートショック法によりEnterobacter sp.への導入を試みた。その結果、形質転換株の取得に成功した。現在、この形質転換株をシロアリに摂食させ、シロアリ腸内に定着可能であるか検証中である。

In animal intestines, a variety of microbial species coexist and interact with each other, and metabolites circulate. Now, the analysis of complex microbial flora is difficult to predict and analyze the interaction between the main stream and the intestinal microbial flora. This study aims to elucidate the interaction between bacterial species and other bacterial species, the role of symbiotic systems, and the interaction between bacterial species and other bacterial species. This study aims to investigate the possibility of folic acid supply to lactic acid bacteria, which is essential for the production of essential folic acid, and to clarify the interaction between bacteria that are difficult to culture, and to modulate the effects of intestinal microflora on the induction of lactic acid bacteria. We are trying to make a new strain of Lactobacillus reticulitermitis JCM32106 that can kill bacteria in the intestines.まず、L. The development of lactic acid bacteria in retinitis is indicated by the establishment of a morphological transformation system. The introduction method of the new method is discussed. Various conditions are discussed, and the method of obtaining the quality of the plant is established. The development of lactic acid bacteria and the establishment of a method for the production of mutant strains Green Light Green Light Green light Green light The results and the quality of the plant were successful. Now, the quality of the plant is changing, and it is possible to determine the quality of the plant.