化学的連結法による低分子化抗体ターゲティングシステムの開発

利用化学键合方法开发低分子抗体靶向系统

基本信息

批准号：
21K06453
负责人：
秋葉宏樹
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、従来の抗体低分子化技術の欠点である、結合能と安定性の両立の難しさに対して、有機化学を利用した分子連結デザインを組み込むことによって、「投与時には安定なFab（低分子抗体）であり、標的上で強固な多価結合を示す分子に変換される」システムを構築することを目的としている。2022年度は、細胞を利用した評価系を構築するとともに、分子構造最適化、三官能性リンカーを利用した機能性部位の導入を計画していた。本年度の研究では、主に分子連結デザインのリンカー構造依存性を検証するとともに、精密評価のための組み換えTNFR2の取得条件の最適化を実施した。その結果、反応速度の推定に十分な実験系が構築できた。これを利用することで、リンカー構造依存性としては、PEGの自由運動時の両末端間距離が反応速度に大きな影響を与えることを明らかとした。また、構造生物学の観点からより高精度な情報を得るために、結晶構造のすでに明らかとなっている抗原・抗体の組み合わせに予備的な展開を進めたほか、利用している抗体の抗原複合体構造取得を目的としたタンパク質構造最適化を実施した。研究計画に関連して、特に夾雑系でのリンカー構造安定性の観点を含め、これまでの知見を踏まえた三官能性リンカーの準備を開始した。一方で、細胞を利用した評価系については、三官能性リンカーを用いる必要があることが明らかとなったため、次年度に実施することとした。

这项研究旨在建立一个系统，该系统“在给药时结合了稳定的晶圆厂（小分子抗体），并通过使用有机化学的分子链接设计来响应于实现粘合能力和稳定性的难度，将有机化学的分子链接设计通过有机化学，将分子链接设计纳入靶标，从而在目标上表现出可靠的多价结合。在2022财年，我们计划使用单元格建立一个评估系统，优化分子结构并使用三功能接头引入功能位点。今年的研究主要检查了分子链接设计的接头结构依赖性，并优化了重组TNFR2的采集条件以进行精确评估。结果，构建了足够的实验系统以估计反应速率。通过利用这一点，可以发现，作为接头结构的依赖性，PEG自由移动期间末端之间的距离对反应速率具有重大影响。此外，为了从结构生物学的角度获得更准确的信息，我们已经进行了抗原抗体组合的初步开发，这些组合已经在晶体结构中揭示了，并且还优化了蛋白质结构，目的是获得所使用抗体的抗原复杂结构。关于研究设计，三功能接头的准备已开始考虑以前的发现，包括污染系统中接头结构稳定性的观点。另一方面，据透露，有必要将三功能的链接器用于基于细胞的评估系统，因此决定在明年实施该系统。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Visualization of Antigen Binding on DNA Origami Using Atomic Force Microscopy

使用原子力显微镜观察 DNA 折纸上抗原结合的可视化

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yuki Minamide;Kentaro Nishiyama;Tomoya Niki;Hiroki Akiba;Satoshi Nagata;Haruhiko Kamada;Hiroaki Ohno;Akinori Kuzuya
通讯作者：
Akinori Kuzuya

近接する抗体エピトープを蛍光により可視化する技術の開発

开发利用荧光可视化相邻抗体表位的技术