尿を試料としたオミックス解析による腎移植後拒絶反応に対する早期診断法の開発

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腎移植後における慢性拒絶反応は、移植腎の生着または廃絶に直接影響するため、早期発見に基づく治療介入が重要である。移植腎生検（プロトコル腎生検）は、臨床的症状や検査値に異常がない場合でも、拒絶反応の早期発見を目的として定期的に実施される。しかし、腎生検は侵襲性が非常に高く、大量出血や腹腔内臓器損傷などのリスクを伴うため患者や移植腎への負担も大きいのに加えて、拒絶反応と診断される割合は全体の20-25％程度である。すなわち、患者の安全性確保のためにも、非侵襲的な方法により拒絶反応を的確かつ早期に診断できる尿中バイオマーカーの開発が望まれている。マイクロRNA（miRNA）は、細胞内に存在する1本短鎖RNAであり、塩基配列の相補性により標的遺伝子の翻訳・転写抑制を介して複数の遺伝子やタンパク質発現を同時に制御する。本研究では、尿中に分泌されたエクソソームが主に腎組織由来であることから、エクソソームに内包されたmiRNAに着目し、腎移植後の慢性拒絶反応における尿中バイオマーカーの探索を行った。腎生検の病理診断により、T細胞関連型拒絶反応と診断された患者と拒絶反応なしと診断された患者の2群に分け、尿中エクソソーム内miRNAの発現をmiRNAマイクロアレイ解析により比較検討した。その結果、バイオマーカー候補分子として数種類のmiRNAが見出された。この特定されたmiRNAについて、バイオマーカーとしての有用性を検証する目的で、アレイ解析に用いた尿検体とは別の患者の尿検体を用いてRT-PCRにより検討を行った。