コレシストキニン受容体CCK1Rの脳腸機能相関における伝達基盤解明

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前年度までの検討により、延髄孤束核および最後野におけるCCK1Rは迷走神経下神経節由来の中枢枝に局在することが強く予想されたため、本年度はCCK1Rの関与する神経回路の詳細な解析を行った。始めに迷走神経下神経節に順行性神経トレーサーを注入し、迷走神経背側神経核複合体領域における迷走神経下神経節ニューロンの中枢枝の分布を検討した。順行性に標識された終末は両側の孤束核および最後野に認められたが、対側に比べ注入側の孤束核において数多くの標識終末が認められた。続いて標識終末の神経化学的特性および標識終末上のCCK1R局在を検討するために、CCK1Rおよびvesicular glutamate transporter (VGluT)2の多重蛍光免疫染色を行った。その結果、順行性に標識された神経終末はVGluT2陽性のグルタミン酸作動性神経終末であり、標識神経の終末近傍において数多くのCCK1Rの免疫反応が認められた。前年度行ったin situ hybridizationを用いた検討では、迷走神経下神経節におけるCCK1R mRNA発現細胞のほぼ全てにVGluT2 mRNAの発現が認められた。神経標識法の結果はin situ hybridizationの結果とも一致する。最後に迷走神経下神経節切断によるCCK1RおよびVGluT2染色性の変化を検討した。片側の迷走神経下神経節を切断し、数日後、延髄孤束核においてCCK1RおよびVGluT2の蛍光免疫染色を行った。その結果、切断側の孤束核においてCCK1RおよびVGluT2の染色性は非切断側と比較して有意な低下が認められた。以上の神経標識法および迷走神経下神経節切断による結果から、延髄孤束核および最後野におけるCCK1Rは迷走神経下神経節由来の中枢枝上に多く局在することが明らかとなった。