In vivo ナノ解析による心筋収縮のリズム調節機構の解明

利用体内纳米分析阐明心肌收缩的节律调节机制

基本信息

  • 批准号:
    21K06789
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

令和4年度の研究実施計画に沿って、マウスin vivo左心室の心筋細胞内ナノ計測システム(2光路系を含む)を用いて、生きたマウスの左心室における異なる2要素(例:サルコメア動態と細胞内Ca2+濃度)の動態解析を行った。Z線に局在するACTN2にCaセンサー蛍光タンパク質GCaMPを融合したアデノウイルスベクターAd-α-ACTN2-GCaMPと橙色蛍光タンパク質を融合したAd-α-ACTN2-TagRFPを心筋細胞に発現させる最適な感染条件の検討を行った。また、Cal-520とα-ACTN2-TagRFPの同時イメージングを行い、生きたマウスの心臓におけるサルコメア長とCa2+同時イメージングの最適条件を検討した。また細胞膜染色試薬CellMaskとCa2+指示薬の組み合わせによって、T管とCa2+動態の同時イメージングも行った。並行して、サルコメアイメージングに必須のZ線の標識効率を上げるため、アデノウイルスベクターでの遺伝子導入法に代わり、時期特異的α-ACTN2-AcGFPノックインマウスの作製に着手し、遺伝子を導入する座の選定や遺伝子導入用コンストラクト作製を行なった。しかしながらα-Actinin2-AcGFP遺伝子を含むコンストラクトにマウス受精卵に対する予想外の毒性があることが発覚したため、当該のノックインマウス作製には遅れが生じている。令和3年度に発表した生きたマウスの心臓におけるサルコメアの同調性の論文に関してはJournal of General Physiology誌のコメンタリーに取り上げられた。さらにこのサルコメア同調性解析を用いてマウスの左心室容積、左心室圧を一過性に変化させた際の個々のサルコメア間の同調性が心機能にどのような影響を与えるかを調査した。この研究成果は第100回日本生理学会大会において発表した。
Make and 4 year be の research plan に along っ て, マ ウ ス の heart muscle cells in vivo left ventricle ナ ノ measuring シ ス テ ム (2 light path を む) を with い て, raw き た マ ウ ス の left ventricular に お け る different な る 2 elements (example: サ ル コ メ ア dynamic と intracellular Ca2 + concentration) の line dynamic analytic を っ た. Z line に bureau in す る ACTN2 に Ca セ ン サ ー 蛍 light タ ン パ ク qualitative GCaMP を fusion し た ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー Ad - alpha ACTN2 - GCaMP 蛍 と orange light タ ン パ ク qualitative を fusion し た Ad - alpha ACTN2 - TagRFP を heart muscle cells に 発 now さ せ optimal な infection conditions る の 検 line for を っ た . ま た, Cal - 520 と alpha ACTN2 - TagRFP の simultaneously イ メ ー ジ ン グ を い, raw き た マ ウ ス の heart viscera に お け る サ ル コ メ ア long と Ca2 + and イ メ ー ジ ン グ の optimal condition を beg し 検 た. ま た membrane staining try 薬 CellMask と Ca2 + instructions 薬 の group み close わ せ に よ っ て, T tube と Ca2 + dynamic の also イ メ ー ジ ン グ も line っ た. Parallel し て, サ ル コ メ ア イ メ ー ジ ン グ に must の Z line の logo sharper rate を げ る た め, ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー で の heritage 伝 import method に わ generation り period, specific alpha ACTN2 - AcGFP ノ ッ ク イ ン マ ウ ス の cropping に to し, but 伝 を import す る seat の selected や heritage 伝 son import with コ ン ス ト ラ ク ト system Youdaoplaceholder0 lines なった. し か し な が ら alpha Actinin2 - AcGFP posthumous son 伝 を containing む コ ン ス ト ラ ク ト に マ ウ ス fertilized egg に す seaborne る to think outside の toxicity が あ る こ と が 発 覚 し た た め, when the の ノ ッ ク イ ン マ ウ ス cropping に は 遅 れ が raw じ て い る. Make and 3 year に 発 table し た raw き た マ ウ ス の heart viscera に お け る サ ル コ メ ア の coherence の paper に masato し て は -- General Physiology tzu の コ メ ン タ リ ー に take on り げ ら れ た. さ ら に こ の サ ル コ メ ア coherence analytical を with い て マ ウ ス の left ventricular volume and left ventricular 圧 を transient に variations change さ せ た interstate の a 々 の サ ル コ メ ア の coherence between が heart function に ど の よ う な influence を and え る か を survey し た. The research results of <s:1> were presented at the 100th general meeting of the Japanese Physiological Society にお にお て て.

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
In vivo心臓ナノ生理学: サルコメア運動の同調性によるポンプ機能の制御
体内心脏纳米生理学:通过肌节运动同步控制泵功能
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Satomi Kagota;Kana Maruyama-Fumoto;Kana Morikawa;Kazumasa Shinozuka;小比類巻生;小比類巻 生
  • 通讯作者:
    小比類巻 生
In vivo cardiac nano-physiology: sarcomere synchronization and ventricular contractility
体内心脏纳米生理学:肌节同步和心室收缩力
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Satomi Kagota;Kana Maruyama-Fumoto;Kana Morikawa;Kazumasa Shinozuka;小比類巻生
  • 通讯作者:
    小比類巻生
Synchrony of sarcomeric movement regulates left ventricular pump function in the in vivo beating mouse heart.
  • DOI:
    10.1085/jgp.202012860
  • 发表时间:
    2021-11-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kobirumaki-Shimozawa F;Shimozawa T;Oyama K;Baba S;Li J;Nakanishi T;Terui T;Louch WE;Ishiwata S;Fukuda N
  • 通讯作者:
    Fukuda N
Synchrony of sarcomere dynamics in the in vivo beating mouse heart.
体内跳动的小鼠心脏中肌节动力学的同步性。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    小比類巻生;下澤東吾;大山廣太郎;照井貴子;石渡信一;福田紀男
  • 通讯作者:
    福田紀男
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小比類巻 生其他文献

金ナノロッドのフォトサーマル効果を利用したドラッグデリバリーシステム
利用金纳米棒光热效应的药物输送系统
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    小比類巻 生;照井貴子;水野紅里;影本達也;下澤東吾;石渡信一;栗原 敏;福田紀男;新留琢郎
  • 通讯作者:
    新留琢郎
心筋サルコメアイメージングの試み
心肌肌节成像的尝试
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    照井貴子;小比類巻 生;水野紅理;影本達也;石渡信一;栗原 敏;福田紀男
  • 通讯作者:
    福田紀男
近赤外光によりコントロールできる薬物放出, 薬学雑誌
近红外光控制药物释放,制药杂志
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    福田紀男;芹澤隆博;照井貴子;下澤東吾;小比類巻 生;影本達也;石渡信一;栗原 敏;新留琢郎
  • 通讯作者:
    新留琢郎
Omecamtiv mecarbil がブタ左心房および左心室スキンド標本のCa2+感受性に与える影響
omecamtiv mecarbil 对猪左心房和左心室皮肤标本 Ca2+ 敏感性的影响
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中西智博;大山廣太郎;田中啓之;小比類巻 生;石井秀弥;照井貴子;石渡信一;福田紀男
  • 通讯作者:
    福田紀男
α-Actinin-GFPを用いたアダルト心筋細胞のサルコメア長計測
使用 α-肌动蛋白-GFP 测量成人心肌细胞的肌节长度
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    小比類巻 生;照井貴子;水野紅理;影本達也;下澤東吾;石渡信一; 栗原 敏;福田紀男
  • 通讯作者:
    福田紀男

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  • 通讯作者:
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    $ 2.66万
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  • 批准号:
    22K06073
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 2.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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