in vivoイメージングによるSARS-CoV-2治療薬の評価系の確立

利用体内成像建立 SARS-CoV-2 疗法的评估系统

• 批准号: 22K06073
• 负责人: 浅賀 正充
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06073/
• 关键词: SARS-CoV-2; リバースジェネティクス

世界的なパンデミックを引き起こした新型コロナウイルス感染症は、全世界で非常に大きな問題として喫緊な対策が求められている。SARS-CoV-2の治療薬開発では動物での薬効評価が必須であるが、時間がかかるため早急な治療薬の開発にはより簡便で迅速な動物感染モデルでの薬剤評価系が必要不可欠である。本申請研究では、in vivoイメージングによりSARS-CoV-2感染マウスを非侵襲的に観察し、中和抗体薬や抗ウイルス治療薬の検討を迅速に行う系の確立を目的とする。本年度は、化学発光遺伝子を組み込んだ組換えSARS-CoV-2の作成を行った。このウイルスは、ウイルスの遺伝子の一部を欠損させる代わりに、化学発光遺伝子を組み込んだウイルスであり、ウイルス感染したマウスに基質を投与することで感染組織で化学発光が起こる。化学発光遺伝子としてAkaLuc遺伝子を挿入したウイルス（rSARS-CoV-2-AkaLuc）の作成を試みた。その結果、AkaLuc遺伝子を挿入した組換えウイルスは増殖しないことが判明した。その原因の1つとして、欠損させるウイルス遺伝子よりも挿入する化学発光遺伝子AkaLucが大きいため、ウイルスゲノムが粒子内にうまくパッケージングされない可能性があることが挙げられる。そこで我々は、AkaLucよりも遺伝子サイズの小さいteLucを挿入した組換えSARS-CoV-2（rSARS-CoV-2-teLuc）を作成することとした。現在rSARS-CoV-2-teLucの作成に成功しており、野生型のウイルスと同程度の増殖速度であることが分かった。今後rSARS-CoV-2-teLucを用いて、マウス生体内での化学発光の検出を試みる予定である。

World な パ ン デ ミ ッ ク を lead き up こ し た new コ ロ ナ ウ イ ル ス adapting just-in-time inventory は, big で all over the world very に き な problem と し て tight な policy が for seaborne め ら れ て い る. SARS - CoV - 2 の treatment 薬 open 発 で は animal で の 薬 unseen review 価 が must で あ る が, time が か か る た め earlier treatment urgent な 薬 の open 発 に は よ り simple で な animal infections quickly モ デ ル で の 薬 が tonic review 価 department need not owe で あ る. This application study で は, the in vivo イ メ ー ジ ン グ に よ り SARS - CoV - 2 infection マ ウ ス を of noninvasive に 観 し, neutralizing antibody 薬 や resistance ウ イ ル ス treatment 薬 の 検 please を に line う is の quickly establish を purpose と す る. This year, 伝 and 伝 subgroups を and み込んだ of chemical release of light were replaced with えSARS-CoV-2 samples to form を subgroups った. こ の ウ イ ル ス は, ウ イ ル ス の heritage 伝 の a を son owe loss さ せ る generation わ り に group, chemical 発 light but 伝 を み 込 ん だ ウ イ ル ス で あ り, ウ イ ル ス infection し た マ ウ ス に substrate を cast and す る こ と で で chemical 発 light が infected tissue こ る. Traces of chemical 発 light 伝 son と し て AkaLuc heritage 伝 son を scions into し た ウ イ ル ス (rSARS - CoV - 2 - AkaLuc) の made を try み た. そ の results, AkaLuc but 伝 を scions into し た group in え ウ イ ル ス は raised colonization し な い こ と が.at し た. そ の reason の 1 つ と し て, owe damage さ せ る ウ イ ル ス heritage 伝 son よ り も scions into す る chemical 発 light heritage 伝 son AkaLuc が big き い た め, ウ イ ル ス ゲ ノ ム が particles within に う ま く パ ッ ケ ー ジ ン グ さ れ な い possibility が あ る こ と が 挙 げ ら れ る. そ こ で I 々 は, AkaLuc よ り も posthumous son 伝 サ イ ズ の small さ い teLuc を scions into し た group in え SARS - CoV - 2 (rSARS - CoV - 2 - teLuc) を made す る こ と と し た. Now rSARS - CoV - 2 - teLuc の made に successful し て お り, wild type の ウ イ ル ス と の raised the same extent colonization rate で あ る こ と が points か っ た. In the future, rSARS-CoV-2-teLucを will be determined by を て, で in vivo chemical luminescence <e:1> 検 を test みる.