Elucidation of the mechanism by which paxillin controls vascular abnormal contraction

阐明桩蛋白控制血管异常收缩的机制

• 批准号: 21K06782
• 负责人: 張 影
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06782/
• 关键词: 血管攣縮; paxillin; チロシンリン酸化; abnormal contraction; tyrosine phosphorylation; SPC

血管平滑筋の異常収縮である血管攣縮は、心筋梗塞、脳梗塞などの急性発症で重篤な血管病を引き起こし、突然死の主因であり、根本的な治療法が見つかっていない。我々は新規分子創薬標的探索のため、血管攣縮のシグナル『スフィンゴシルホスホリルコリン(SPC)→Fyn→Rhoキナーゼ(ROK)』経路中、プルダウンアッセイと質量分析計によりFyn下流の新規分子paxillinを発見した。本研究では、異常収縮刺激時活性化されたFynによりpaxillinが真にチロシンリン酸化されるかに注目した。具体的に、下記の実験を実施した。同定したpaxillinのチロシンリン酸化部位を変異させ、リン酸化できないようにした変異体を作成し、ヒト冠状動脈平滑筋細胞に導入して、SPCにより異常収縮刺激し、細胞の収縮を抑えるかタイムラプス顕微鏡を用いて検討した。

血管痉挛是血管平滑肌的异常收缩，会导致急性发作（例如心肌梗死和脑梗塞）严重的血管疾病，这是突然死亡的主要原因，并且尚未发现基本治疗。我们在血管痉挛信号“鞘磷酸磷酸胆碱（SPC）→FYN→FYN→RHO激酶（ROK）”中，通过下拉测定法和质谱仪在FYN下游发现了一个新型分子，以寻找用于寻找新型分子药物发现靶标的途径。在这项研究中，我们专注于帕西林是否由FYN磷酸化，这是在异常收缩刺激中被激活的。具体而言，进行了以下实验。创建了一个突变体，该突变体突变了帕克西林的已鉴定的酪氨酸磷酸化位点，以防止磷酸化，并引入人类冠状动脉平滑肌细胞，刺激SPC的异常收缩，以及使用延时显微镜研究了细胞是否被抑制至收缩。

项目成果

Sulforaphane suppresses metastasis of triple-negative breast cancer cells by targeting the RAF/MEK/ERK pathway to inhibit actin stress fiber formation

萝卜硫素通过靶向RAF/MEK/ERK通路抑制肌动蛋白应激纤维形成来抑制三阴性乳腺癌细胞的转移

• 发表时间: 2022
• 作者: Ying Zhang;Qian Lu;Nan Li;Ming Xu;Tatsuo Miyamoto;Jing Liu
• 通讯作者: Jing Liu

血管平滑筋異常収縮のシグナル伝達における中間径フィラメントビメンチン断片化の役割の解明

阐明中间丝波形蛋白断裂在异常血管平滑肌收缩信号转导中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 岸 博子;路 倩;森田 知佳;張 影;李 楠;小林 誠
• 通讯作者: 小林 誠

異常収縮刺激時Fynの活性化によるpaxillinのチロシンリン酸化について

异常收缩刺激期间 Fyn 激活导致桩蛋白酪氨酸磷酸化

• 发表时间: 2021
• 作者: 張 影;呂 博超;森田 知佳;岸 博子;路 倩;李 楠;小林 誠
• 通讯作者: 小林 誠

Specific inhibitory effects of compound T, upon pre- or post-treated, on the sphingosylphosphorylcholine (SPC)-induced Ca2+-sensitization of vascular smooth muscle contraction through suppressing the Fyn/Rho-kinase signaling pathway, without affecting Ca2

化合物T在预处理或后处理后，通过抑制Fyn/Rho激酶信号通路，对鞘氨醇磷酸胆碱（SPC）诱导的血管平滑肌收缩的Ca2+敏化产生特异性抑制作用，而不影响Ca2+

• 发表时间: 2021
• 作者: Nan Li;Ying Zhang;Hiroko Kishi;Tomoka Morita;Bochao Lyu;Sei Kobayashi.
• 通讯作者: Sei Kobayashi.

Paxillinは活性型Fynに直接結合することにより血管平滑筋細胞のストレスファイバー形成と細胞遊走を制御する

Paxillin 通过直接与活化的 Fyn 结合来调节血管平滑肌细胞中的应激纤维形成和细胞迁移

• 发表时间: 2022
• 作者: 張 影;森田 知佳;小林 誠;岸 博子;宮本 達雄
• 通讯作者: 宮本 達雄