腸炎ビブリオ菌の感染過程における粘性環境応答と病原性発揮機構の解明

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腸炎ビブリオは、魚介類を汚染しヒトに炎症性の下痢を引き起こす病原細菌である。III型分泌装置が病原性に深く関与しており、これを使って宿主腸管細胞内へ直接病原タンパク質を送り込むことができる。このような感染様式を持つため、病原性の発揮には上皮細胞の表面まで移動することが重要となる。そこで、腸炎ビブリオの運動・生理活性の変化のような「感染の前提条件」について解析し、腸炎ビブリオ感染症の分子メカニズムでの理解を目指す。本年度は、側べん毛の発現を制御するscrAscrBscrCの解析を行った。ScrBおよびScrCのペリプラズムドメインの過剰発現系を作成し、タンパク質精製を行った。多量のタンパク質の精製に成功し、結晶化を試した。ScrBの微結晶を得ることができた。今後、ScrAとシグナル分子の同定を視野に入れ、機能・構造解析を進める。走化性は、好ましい物質・環境へ近づき、好ましくない物質・環境から遠ざかる能力のことである。そのため、走化性が機能し、腸管上皮細胞へ導かれるのではないかと考えられる。そこで、腸内に存在する様々な代謝物や構成要素に対して走化性を示すかどうか解析した。キャピラリーアッセイで評価した結果、乳酸などの代謝産物・中間代謝物などに対して誘引応答あるいは忌避応答を示した。次に、受容体のメチル化修飾アッセイによって、走化性物質と走化性受容体のペアの同定を行った。VP183とピルビン酸・乳酸の組み合わせなど、複数の認識ペアを同定することに成功した。今後さらに詳細な応答プロファイルの一覧を作成し、腸内での腸炎ビブリオの環境応答について明らかにする。