LPA受容体シグナルを介するがん細胞の抗がん剤・放射線感受性調節機構の解明

脂質メディエーターであるリゾフォスファチジン酸（LPA：lysophosphatidic acid）は、Gタンパク共役型LPA受容体（LPA1～LPA6）に結合することで多様な細胞応答を誘発する。近年、がんの発生・進展にLPA受容体シグナル異常が検出されるとともに、LPA受容体シグナルの活性化が、がん細胞の増殖・運動・浸潤・転移および造腫瘍性などのがん細胞の増悪化制御に深く関わることが明らかになりつつある。さらに、がん細胞の抗がん剤抵抗性獲得にもLPA受容体シグナルが重要な役割を担うことが示唆されている。今年度は、がん細胞の抗がん剤・放射線感受性の制御における各LPA受容体の役割を検索することを目的として研究を行った。①抗がん剤処理によるがん細胞の細胞生存率に対するLPA受容体の機能解析：骨肉腫（MG-63）細胞のシスプラチン（CDDP）に対する細胞生存率は、GRI-977143（LPA2アゴニスト）処理にて上昇、（2S）-OMPT （LPA3アゴニスト）処理により低下した。また、CDDPに対する細胞生存率は、LPA4ならびにLPA6ノックダウン細胞において有意に上昇することがわかった。②がん細胞の放射線抵抗性におけるLPA2の増強作用：膵がん細胞に放射線を照射するとLPA2発現レベルの上昇が見られることから、LPA2ノックダウン細胞を作成し放射線照射を行ったところ、コントロール細胞に比してLPA2ノックダウン細胞の細胞生存率は有意に低下した。Western blot法によるcleaved PARP-1タンパクの解析により、LPA2を介するアポトーシス抑制効果が放射線抵抗性増強につながることが示された。一方、放射線によるDNA損傷・修復は、コントロール細胞およびLPA2ノックダウン細胞間で差異は見られなかった。

脂質メディエーターであるリゾフォスファチジン酸（LPA：lysophosphatidic acid）は、Gタンパク共役型LPA受容体（LPA1～LPA6）に結合することで多様な細胞応答を誘発する。近年、がんの発生・進展にLPA受容体シグナル異常が検出されるとともに、LPA受容体シグナルの活性化が、がん細胞の増殖・運動・浸潤・転移および造腫瘍性などのがん細胞の増悪化制御に深く関わることが明らかになりつつある。さらに、がん細胞の抗がん剤抵抗性獲得にもLPA受容体シグナルが重要な役割を担うことが示唆されている。今年度は、がん細胞の抗がん剤・放射線感受性の制御における各LPA受容体の役割を検索することを目的として研究を行った。①抗がん剤処理によるがん細胞の細胞生存率に対するLPA受容体の機能解析：骨肉腫（MG-63）細胞のシスプラチン（CDDP）に対する細胞生存率は、GRI-977143（LPA2アゴニスト）処理にて上昇、（2S）-OMPT （LPA3アゴニスト）処理により低下した。また、CDDPに対する細胞生存率は、LPA4ならびにLPA6ノックダウン細胞において有意に上昇することがわかった。②がん細胞の放射線抵抗性におけるLPA2の増強作用：膵がん細胞に放射線を照射するとLPA2発現レベルの上昇が見られることから、LPA2ノックダウン細胞を作成し放射線照射を行ったところ、コントロール細胞に比してLPA2ノックダウン細胞の細胞生存率は有意に低下した。Western blot法によるcleaved PARP-1タンパクの解析により、LPA2を介するアポトーシス抑制効果が放射線抵抗性増強につながることが示された。一方、放射線によるDNA損傷・修復は、コントロール細胞およびLPA2ノックダウン細胞間で差異は見られなかった。