Untersuchung des Einflusses der Kultivierungsparameter auf die N- und O-Glykosylierung rekombinanter Proteine in mikroverkapselten Insektenzellen

微囊昆虫细胞中培养参数对重组蛋白 N- 和 O-糖基化影响的研究

• 批准号: 29509159
• 负责人: Dr.-Ing. Harald Lange
• 金额: --
• 依托单位: Lehrstuhl für Bioverfahrenstechnik (BVT) Erlangen
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/29509159?language=en
• 关键词: Untersuchung; des; Einflusses; der; Kultivierungsparameter

Die Glykosylierung ist ein entscheidendes Kriterium für die Funktionalität und die Stabilität von pharmazeutischen Proteinen in der medizinischen Anwendung. Der Einfluss der Sauerstoffkonzentration, der Temperatur, des pH-Wertes, der Nährmedienzusammensetzung, des Produkternte- und Infektionszeitpunktes und der genetischen Regulation der Expressionsstärke auf das Glykosylierungsmuster während der Expression rekombinanter Proteine werden durch eine effiziente Glykosylierungsanalyse mittels MALDI-QIT-ToF untersucht. Die dabei gewonnenen Erkenntnisse hinsichtlich der Besetzung der Glykosylierungsstellen, des Glykosylierungstyps und der Glykansequenz soll ausgehend von rekombinanten Musterglykoproteinen auf die Expression therapeutischer Proteine übertragen werden. Eine authentische Glykosylierung humaner Proteine wird derzeit vorrangig in Säuger-Expressionssystemen erzielt. Das vorliegende Projekt soll daher die Etablierung immobilisierter Insektenzellen als effiziente Alternative eines Expressionssystems für Proteine mit authentischen Glykosylierungsmustern ermöglichen. Inwiefern dabei Mono- oder Disaccharide des Mediums in die Glykosylierungen eingebaut werden, wird durch die Zugabe von [1-13C]-D-Glucose, [1-13C]- D-Mannose, [1-13C]-D-Galactose und [1-13C]-D-Lactose als C-Quelle untersucht.

Die Glykosylierung ist ein entscheidendes Kriterium <e:1> r Die Funktionalität and Die Stabilität von pharmazeutischen Proteinen in der medizinischen Anwendung。Der infinfuss Der sauerstoffkonconcentration, Der temperature, des pH-Wertes, Der Nährmedienzusammensetzung， des produckterund Infektionszeitpunktes and Der genetischen Regulation Der Expressionsstärke aufdas glyksylierungsmuster während Der表达重组蛋白werden durchine effizente glyksylierungsanalyse mittel MALDI-QIT-ToF untersut。糖蛋白表达治疗学研究进展：糖蛋白表达治疗学研究进展：糖蛋白表达治疗学研究进展。真性Glykosylierung人蛋白在Säuger-Expressionssystemen erzielt中表达。Das vorliegende Projekt solher . d . Etablierung immobilisierter . Insektenzellen . als . effiziente . Alternative eines表达系统：<s:1> r蛋白[m] . authentischen Glykosylierungsmustern ermöglichen。[1-13C]- d -葡萄糖，[1-13C]- d -甘露糖，[1-13C]- d -半乳糖，[1-13C]- d -乳糖，[1-13C]- d -乳糖，C-Quelle untersucht.]