輸血関連急性肺傷害病態解明のための基礎的研究－CTL2分子間ネットワークの解明－

阐明输血相关急性肺损伤病理学的基础研究 - CTL2分子网络的阐明 -

• 批准号: 21K07361
• 负责人: 岡崎 仁
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07361/
• 关键词: 輸血関連急性肺障害; 輸血副反応; CTL2/HNA3; 輸血関連急性肺傷害

CTL2/HNA3のQ154R多型（HNA3a/b）をもつレトロウィルス発現系ではCTL2/HNA3の発現量が不十分であったことが判明したため、マウス由来の細胞株ATDC5, NIH3T3にプラスミド発現系を用いてQ154R多型HNA3a/bそれぞれのCTL2/HNA3を強制発現させる高発現クローンの作出に成功した。現在これらに抗CTL2抗体を作用させin vitroのTRALI細胞モデルとしてワークさせるための条件検討を行っているが、市販の抗CTL2抗体にはマウスの内在性CTL2と交差反応するものが多く、高発現細胞特異的かつHNA3a優位にミエロペルオキシダーゼ活性を上昇させる系の確立には、さらなる検証が必要な状況であるHL60細胞にC末端Halo-tagおよびMyc-tag付きのCTL2発現プラスミドを一過性に導入して発現を確認したが、導入効率が悪く十分な量のCTL2蛋白を発現させることはできなかった。そこでアデノウィルス発現系を作成しHL60細胞とヒト末梢血由来多形核細胞（好中球を含む分画）に導入し、十分な量の発現系を作成した。この系であらためて大量調製系の検討を行っている。細胞への発現系の作成に手間取ったため、CTL2/HNA3の結合蛋白同定のため、並行して酵母を用いたツーハイブリッドシステムによるライブラリースクリーニングを行った。結果として、特異的に結合する蛋白の同定に成功した。現在CTL2の機能にどのような影響を与えるのか、作成中のin vitro TRALI細胞モデルを用いて検証中である。輸血副反応患者の残余血清の収集を継続した。症例数・検体量とも限られるため、症例数の蓄積を待って最終年度に解析に移行する予定である。

发现CTL2/HNA3的Q154R多态性（HNA3A/B）在逆转录病毒表达系统中的表达水平不足使用质粒表达系统的小鼠衍生细胞系ATDC5和NIH3T3中的多态性HNA3A/B。 Currently, conditions are being investigated to enable the use of anti-CTL2 antibodies to work as an in vitro TRALI cell model, but many commercially available anti-CTL2 antibodies cross-react with endogenous CTL2 in mice, and further verification is required to establish a system that is highly expressed cell-specific and increases myeloperoxidase activity with HNA3a dominant, and further verification is required to confirm expression, but the introduction效率很差，无法表达足够数量的CTL2蛋白。因此，创建了腺病毒表达系统，并引入HL60细胞和人类外周血衍生的多形核细胞（含有嗜中性粒细胞的馏分），以创建足够数量的表达系统。我们再次使用该系统调查了大规模准备系统。因为花了一些时间来创建一个用于单元格的表达系统，所以使用酵母并行的两杂交系统进行库筛选，以识别CTL2/HNA3的结合蛋白。结果，我们成功地鉴定了专门结合的蛋白质。当前，我们目前正在使用当前正在开发的体外Trali细胞模型来检查CTL2功能的效果。继续收集输血副反应患者的残留血清。由于案例和样本量的数量有限，我们计划在最后一年进行分析，等待案例的积累。

项目成果

自己血貯血時の高用量静注用鉄剤投与は貯血後・術前貧血の予防に有効である

自体采血期间高剂量静脉补铁可有效预防术后和术前贫血。

• 发表时间: 2022
• 作者: 池田敏之; 寺田類; 小林佳子; 岡崎仁
• 通讯作者: 岡崎仁

ＣＯＶＩＤ－１９感染拡大により影響を受けた自己血輸血利用者の実態調査

受COVID-19感染传播影响的自体输血使用者调查

• 发表时间: 2021
• 作者: 高橋美香;池田敏之;寺田類;関口ひろみ;岡崎仁
• 通讯作者: 岡崎仁

International Forum on Policies and Practice for Transfusion of ABO and RhD Non‐Identical Platelets: Summary

ABO 和 RhD 异种血小板输注政策与实践国际论坛：总结

• DOI: 10.1111/vox.13129
• 发表时间: 2021
• 期刊: Vox Sanguinis
• 影响因子: 2.7
• 作者: Cardigan Rebecca;Ikeda Toshiyuki;Goto Naoko;Okazaki Hitoshi;Dunbar Nancy et al.
• 通讯作者: Dunbar Nancy et al.

High D‐index during mobilization predicts poor mobilization of CD34+ cells after anti‐lymphoma salvage chemotherapy

动员期间高 D 指数预示抗淋巴瘤挽救化疗后 CD34+ 细胞动员不良

• DOI: 10.1002/jca.21943
• 发表时间: 2021
• 期刊: Journal of Clinical Apheresis
• 影响因子: 1.5
• 作者: Ebisawa Kazutoshi;Honda Akira;Chiba Akira;Masamoto Yosuke;Okazaki Hitoshi;Kurokawa Mineo
• 通讯作者: Kurokawa Mineo

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