Studies on the regulatory mechanisms by novel bioactive peptide and receptor systems

新型生物活性肽及受体系统调控机制研究

基本信息

批准号：
21K08543
负责人：
森健二
金额：
$ 2.66万
依托单位：
National Cardiovascular Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ペプチドホルモンや神経ペプチドに代表される生理活性ペプチドは、細胞間の情報伝達を担う主要な分子の１つであり、内分泌的調節だけでなく摂食、飲水、性行動及び睡眠覚醒などの本能行動や、生体の恒常性を維持するための自律機能を調節するなど、生体の制御及び恒常性維持において重要な役割を果たしている。このため、未だ知られていない生体制御機構を明らかにするために、新しい生理活性ペプチドの探索や発見できた生理活性ペプチドの機能解析研究が現在でも盛んに実施されている。これまでに、リガンドが不明なオーファンGPCRをCHO細胞やHEK293細胞で発現させて、そのアゴニスト活性を組織抽出物から見出すことにより、新たな生理活性ペプチドを同定した。その過程において、ラット心房から抽出したペプチド画分にHEK293細胞でのcAMP産生を誘導する活性が含まれることを見出している。このcAMP産生誘導活性のゲルろ過クロマトグラフィーにおける分子量や陽イオン交換クロマトグラフィーにおける保持時間を検討したところ、既知の生理活性ペプチドとは異なる物性を持つことが明らかになり、未知の生理活性ペプチドの存在が示唆された。そこで、高速液体クロマトグラフィーを駆使した複数回の精製によりこの活性を有するペプチドを精製したが、純度や収量の低さが原因となり構造決定には至らなかった。しかしながら、ラット心室にも同様の活性が認められたため、精製と構造解析を実施した。また、これまでに新しい生理活性ペプチドとしてNMU precursor-related peptide（NURP）を同定し、興味深い生物活性を有することを示してきた。このNURPについて、その受容体探索を進めた。

生物活性肽，例如肽激素和神经肽，是负责细胞对细胞沟通的主要分子之一，在控制和维持人体的体内平衡方面起着重要作用，不仅是内分泌调节，而且还可以进行内分行为，而且还可以保持喂养，饮酒，性行为，性行为以及落后于体内的疗效，以及保持体内的效果，以维持体内的体内。因此，为了阐明未知的生物控制机制，寻找新的生物活性肽和对已经发现的生物活性肽的功能分析的研究仍在进行。迄今为止，通过在CHO细胞和HEK293细胞中表达配体未知配体的孤儿GPCR，并在组织提取物中找到其激动剂活性，从而鉴定出了新的生物活性肽。在此过程中，已经发现从大鼠心房提取的肽级分包含诱导HEK293细胞cAMP产生的活性。研究凝胶过滤色谱中的分子量和保留时间的cAMP生产诱导活性时，发现它具有与已知的生理活性肽的物理性质不同，这表明存在未知的生理活性肽。因此，使用高性能液相色谱法纯化具有这种活性的肽是通过多纯化纯化的，但是由于纯度和产量较低，因此未确定结构。但是，在大鼠心室中观察到了相似的活性，并进行了纯化和结构分析。此外，NMU前体相关肽（NURP）已被确定为一种新的生物活性肽，表明它具有有趣的生物学活性。我们开始寻找这个NURP。