Pathophysiological investigation for skeletal deformities of musculocontractural Ehlers-Danlos syndrome using iPS and genome-editing tool

使用 iPS 和基因组编辑工具对肌肉收缩性 Ehlers-Danlos 综合征的骨骼畸形进行病理生理学研究

• 批准号: 21K09246
• 负责人: 岳 鳳鳴
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09246/
• 关键词: iPS疾患モデル; エーラス・ダンロス症候群; 脊椎変形; CHST14遺伝子変異; 疾患iPS細胞; ゲノム編集技術; 筋拘縮型EDSの疾患モデル

エーラス・ダンロス症候群（EDS）は皮膚・関節の過伸展性、各種組織の脆弱性を特徴とする先天性疾患の総称であり。本学は、D4ST1をコードするCHST14遺伝子の変異によって起きるmcEDSを見出した。EDSの様々な型において認められ、骨の変形が進行し、高度になると、体幹バランスの悪化、呼吸機能障害、摂食障害などを生じ、患者のQOL / ADLを低下させる最も重要な症状の一つである。しかし、患者から組織サンプルを取得するのは困難であり、たとえ組織サンプルが得られても個々の細胞タイプの正確な分析が難しく、骨芽細胞から骨細胞への移行などの一過性のイベントを観察するのはほぼ不可能である。また、骨格変形が遅発 性ための動物モデルでの研究は限られている。それらのことから、発症メカニズムは明らかになっていない。本研究の目的は、患者由来のiPS細胞用いて、骨形成のプロセス全体をモデル化することで、骨格変形の発症を解明することである。昨年度は、既に樹立したmcEDS-CHST14患者の皮膚繊維芽細胞由来iPS細胞（A108, A279, A280）と、対照としてCHST14変異のない正常iPS細胞（253G）を用い、骨形成分化の過程を模倣した段階的分化法で骨様結節の形成を試みた。骨形成細胞の分化過程において、各段階の骨細胞の遺伝子発現を解析し、カルシウム沈着量を測定した。mcEDS-CHST14 患者の皮膚では、コラーゲン線維の集合の障害が観察された。今年度は、骨形成系統におけるコラーゲンとデコリンの分布を調べるために、骨形成分7日目にそれらの遺伝子とたんぱく質の発現を評価した。

エ ー ラ ス · ダ ン ロ ス syndrome (EDS) は skin, masato quarter の stretching, various organizations の vulnerability を 徴 と す る congenital disorders の 総 said で あ り. In this study, 伝, D4ST1をコ をコ ドするCHST14 's 伝 derivative <e:1> changes によって る るmcEDSを are found in を た. EDS の others 々 な type に お い て recognize め ら れ, bone の - shaped が し, highly に な る と, dry body バ ラ ン ス の 悪, breathing function handicap, feed, handicap な ど を じ, の QOL/ADL in patients with low を さ せ る symptoms of the most important な も の a つ で あ る. し か し, patient か ら organization サ ン プ ル を obtain す る の は difficult で あ り, た と え organization サ ン プ ル が have ら れ て も a 々 の cells タ イ プ の な correct analysis が difficult し く bud cells, bone か ら bone cells へ の transitional な ど の transient の イ ベ ン ト を 観 examine す る の は ほ ぼ impossible で あ る. Youdaoplaceholder0, bone structure deformation が遅 occurrence ため <s:1> animal モデ で で <s:1> research limit られて る る る. Youdaoplaceholder0 それら になって と と ら ら, occurrence of メカニズム ら, ら になって になって な な. は の purpose this study, patients with origin の iPS cells with い て, bone formation の プ ロ セ ス all を モ デ ル change す る こ と で, bone - の 発 disease を interpret す る こ と で あ る. In the previous year, に and に were established. The lesion skin 繊 of mcEDS-CHST14 patients originated from iPS cells (A108, A279). A280) と, polices according to と し て CHST14 - different の な い normal iPS cells (253 g) を い, bone formation process of differentiation の を imitate し た Duan Jie differentiation method で bone others nodules の formation を try み た. The <s:1> differentiation process of bone morioblasts にお にお て て, the occurrence of 伝 progeny in each stage of bone bone cells を analysis, カ シウム シウム deposition amount を determination of た た. In patients with mcEDS-CHST14, <s:1> skin で コラ, コラ ゲ ゲ <e:1> line dimension <s:1> collection <s:1> obstruction が観 examination された. Our は, bone formation system に お け る コ ラ ー ゲ ン と デ コ リ ン の distribution を adjustable べ る た め に, bone formation points 7 orders に そ れ ら の heritage 伝 son と た ん ぱ く qualitative の 発 now を review 価 し た.

项目成果

疾患iPS細胞を用いた筋拘縮型EDS骨疾患モデル構築と病態解析

肌肉挛缩型EDS骨病模型构建及病变iPS细胞病理分析

• 发表时间: 2022
• 作者: ASANO YOHEI;YAMAMOTO NORIO;HAYASHI KATSUHIRO;TAKEUCHI AKIHIKO;MIWA SHINJI;IGARASHI KENTARO;YONEZAWA HIROTAKA;ARAKI YOSHIHIRO;MORINAGA SEI;KASAHARA KAZUO;SONE TAKASHI;TSUCHIYA HIROYUKI;岳 鳳鳴
• 通讯作者: 岳 鳳鳴

疾患iPS細胞を用いた筋拘縮型EDS 骨疾患モデル構築と病態解析

利用病变iPS细胞进行肌肉挛缩型EDS骨病模型构建及病理分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Okamoto Yoshinori;Wakama Hitoshi;Okayoshi Tomohiro;Matsuyama Junya;Otsuki Shuhei;Neo Masashi;岳 鳳鳴
• 通讯作者: 岳 鳳鳴