糖鎖伸長抑制因子「バイセクト型糖鎖」の雄性生殖細胞分化制御能の解析

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原因不明の不妊症患者血清中では抗精子抗体が検出されることがある。我々は新規抗精子抗体標的抗原の探索を目的に、特に人為的操作を加えずに2年以上飼育 した老齢雄マウスの脾細胞を用いて、マウス成熟精子頭部に反応する自己抗体由来の単クローン抗体Ts4を樹立し、さらに本抗体がバイセクト型N-アセチルグル コサミン(bisecting GlcNAc)構造を有するフコシル化2本鎖複合型糖鎖への結合を介して複数の糖タンパク質を認識することを明らかにした。Bisecting GlcNAc はGlcNAc転移酵素III (GnT-III)によって付加される。GnT-IIIは悪性腫瘍や神経変性疾患患者の脳において発現量が増加していることが報告されており、GnT-III/バイセクト型糖鎖と疾患との関係が注目されている。その一方、正常組織での本糖鎖の生物学的機能については未だ不明である。これまで我々は、Ts4は精巣内ではTEX101をはじめとする複数の糖タンパク質を認識することを報告してきたが、さらに我々は核膜孔複合体を構成するタンパク質であるnuclear pore glycoprotein p62 (NUP62)を、精巣における Ts4認識分子の一つとして新たに同定した。そこで本研究は、NUP62を介した雄性生殖細胞形成過程におけるバイセクト型糖鎖の分子生物学的機能を明らかにすることを目的とした。その解析ツールとして、我々はマウス及びヒトに共通する抗原ペプチドを作製し、これをウサギに免役することにより複数の多クローン抗体を樹立した。まず本抗体の反応性をウェスタンブロット解析で確認したが、想定される位置にバンドが検出されなかった。NUP62はバイセクト型糖鎖だけでなく、その他の糖鎖修飾を受けている可能性があり、今後糖切断酵素等を用いて、本抗体の反応性の変化を検討する予定である。