唾液腺感受性亢進におけるβアレスチンシグナル経路の関与とその分子機構の解明

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ピロカルピンは唾液分泌促進薬として使用されており、長期の連続服用により唾液分泌量が増加することが知られているが、その分子メカニズムは解明されていない。そこで本研究は、ピロカルピンの長期投与による唾液分泌量増加の分子メカニズムを明らかにすることを目的とする。１）唾液腺由来培養細胞であるHSY細胞を用いて、ピロカルピン刺激による遺伝子発現変化を解析した。HSYにおいてもラットと同様に、ピロカルピン刺激によりCtgfおよびSgk1のmRNA発現量は、無刺激のコントロールに比べて有意に増加した。このCtgf遺伝子の発現増加効果は、MAPキナーゼキナーゼ（MAPKK, MEK）の阻害により抑制されたが、βアレスチンシグナルの阻害剤では抑制されなかった。対して、ピロカルピンによるSgk1のmRNA発現量の増加効果は、βアレスチンシグナルの阻害により抑制された。これらのことから、CtgfとSgk1遺伝子の発現調節は異なる細胞内シグナル経路を介していると考えられる。２）HSY細胞をピロカルピンで刺激し、MAPK (p44/42) のリン酸化を解析したところ、ピロカルピン刺激15分後ではリン酸化量の増加が観察されたが、1日後ではリン酸化の増加効果は見られなかった。３）ラットと同様に、マウス（C57BL/6）にピロカルピンを２回投与し、唾液分泌量を測定したところ、１回目の分泌量より２回目の分泌量が有意に増加していた。マウスにMEK阻害剤を腹腔内投与し、その１時間後にピロカルピン刺激による唾液分泌を測定した。さらにその１週間後のピロカルピン刺激による唾液分泌量を測定し、１回目の分泌量と比較した。MEK阻害剤を前投与したマウスでは、２回目の唾液分泌亢進作用が見られなかった。これらのことから、ピロカルピン２回投与による唾液分泌亢進作用には、MAPキナーゼ系が関与していると考えられる。