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唾液腺感受性亢進におけるβアレスチンシグナル経路の関与とその分子機構の解明

β-arrestin信号通路参与唾液腺过敏及其分子机制的阐明

基本信息

批准号：
21K09821
负责人：
森田貴雄
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The Nippon Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ピロカルピンは唾液分泌促進薬として使用されており、長期の連続服用により唾液分泌量が増加することが知られているが、その分子メカニズムは解明されていない。そこで本研究は、ピロカルピンの長期投与による唾液分泌量増加の分子メカニズムを明らかにすることを目的とする。１）唾液腺由来培養細胞であるHSY細胞を用いて、ピロカルピン刺激による遺伝子発現変化を解析した。HSYにおいてもラットと同様に、ピロカルピン刺激によりCtgfおよびSgk1のmRNA発現量は、無刺激のコントロールに比べて有意に増加した。このCtgf遺伝子の発現増加効果は、MAPキナーゼキナーゼ（MAPKK, MEK）の阻害により抑制されたが、βアレスチンシグナルの阻害剤では抑制されなかった。対して、ピロカルピンによるSgk1のmRNA発現量の増加効果は、βアレスチンシグナルの阻害により抑制された。これらのことから、CtgfとSgk1遺伝子の発現調節は異なる細胞内シグナル経路を介していると考えられる。２）HSY細胞をピロカルピンで刺激し、MAPK (p44/42) のリン酸化を解析したところ、ピロカルピン刺激15分後ではリン酸化量の増加が観察されたが、1日後ではリン酸化の増加効果は見られなかった。３）ラットと同様に、マウス（C57BL/6）にピロカルピンを２回投与し、唾液分泌量を測定したところ、１回目の分泌量より２回目の分泌量が有意に増加していた。マウスにMEK阻害剤を腹腔内投与し、その１時間後にピロカルピン刺激による唾液分泌を測定した。さらにその１週間後のピロカルピン刺激による唾液分泌量を測定し、１回目の分泌量と比較した。MEK阻害剤を前投与したマウスでは、２回目の唾液分泌亢進作用が見られなかった。これらのことから、ピロカルピン２回投与による唾液分泌亢進作用には、MAPキナーゼ系が関与していると考えられる。

The secretion of saliva is stimulated by the use of the drug, and the secretion of saliva is increased by the use of the drug for a long time. The aim of this study is to investigate the effects of long-term administration on salivary secretion and increase the amount of salivary secretion. 1) Salivary gland derived cells were used for analysis of HSY cell development after stimulation. The mRNA expression of Ctgf and Sgk1 in HSY was increased intentionally compared with that in the absence of stimulation. The increase in the occurrence of Ctgf gene results in the inhibition of MAP, MAPKK and MEK. In response to this increase in Sgk1 mRNA production, the inhibition of β-amyloid protein production was observed. The regulation of Ctgf and Sgk1 gene expression in different intracellular pathways 2) HSY cells were stimulated by the tablet and the acidification of MAPK (p44/42) was analyzed. The increase in the amount of acidification was observed after 15 minutes of tablet stimulation, and the increase in acidification was effective one day later. 3) The amount of saliva secreted by the eye was determined by the same method (C57BL/6). The amount of saliva secreted by the eye was increased intentionally. MEK was administered intraperitoneally and saliva secretion was measured after 1 hour. 1 week later, saliva secretion was measured and 1 week later, saliva secretion was compared. MEK block the front and back of the saliva secretion effect is seen The relationship between MAP and salivary secretion is discussed.