GFPマウス歯胚移植における歯根膜再生メカニズムの解明
阐明GFP小鼠牙胚移植牙周膜再生机制
基本信息
- 批准号:21K10061
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究はGFPマウス(ドナー)の歯胚を野生型マウス(レシピエント)の抜歯窩に移植し、移植後に再生された歯根膜がドナー由来(GFP陽性細胞)かレシピエント由来(GFP陰性細胞)かを明らかにすることを目的とする。さらに、再生された歯根膜に含まれる細胞を、ドナー由来のGFP陽性細胞とレシピエント由来のGFP陰性細胞とに分離し、網羅的遺伝子解析を行うことで、各細胞集団における発現遺伝子の特徴を明らかにすることを目指す。初年度においては、GFPマウス歯胚を用いた歯胚移植モデルを確立した。これと並行して、組織学的検討に用いる組織サンプルの脱灰期間の検討を行った。しかしながら、脱灰期間の決定には至らず、次年度に再度検討することとした。そこで当該年度においては、初年度に引き続き組織サンプルの脱灰期間の検討を行った結果、移植後1週・2週・3週に相当する週齢の野生型マウスの上顎組織サンプル(臼歯を含む)について、脱灰期間が各20日・25日・30日で薄切するのに問題ない硬さになることが判明した。次に、生後8日齢のGFPマウス歯胚を生後8日齢の野生型マウスの抜歯窩に移植して、移植後1週・2週・3週の時点で移植歯を含む上顎サンプルを採取し、固定後に上記期間脱灰を行い、パラフィン包埋したブロックを準備した。包埋ブロックを薄切してヘマトキシリン・エオジン染色を行い、歯根伸長、歯胚の成長、歯胚の向きなどの検討を行った。移植歯胚の歯根は概ね良好に伸長し、生後3週になると萌出した移植歯も見られたが、多くの移植歯で近心傾斜が認められた。次年度は移植歯の向きに注意しながら移植を行い、さらなる検討を行うこととする。
In this study, GFP embryos were implanted with wild-type embryos (wild-type embryos). After transplantation, the root membranes were regenerated, the root membranes were regenerated, the origin (GFP sexual cells) were detected, and the origin (GFP sexual cells) were clarified. The root membranes of the cells and regenerators contain GFP cells, the origin of the cells, the separation of the GFP cells, the sub-analysis of the network, and the identification of the data in each cell set. At the beginning of the year, the embryo transfer was confirmed by the use of embryo transfer in the first year, GFP. The co-operation of computer science and computer science should be carried out at the same time. The organization and organization should carry out the operation during the ash removal period. During the ash removal period, it is decided to make a decision during the ash removal period, and again in the next year. In the current year and the beginning of the year, the results of the test results of the organization during the ash removal period, 1-2-3 years after transplantation, and the tissue temperature of the wild-type plant after transplant, and the ash-removal period of 20-30 and 30-30 respectively. On the 8th and 8th postnatal days after birth, the wild type pregnant embryos were transferred on the 8th postnatal day, and at 1: 2 and 3 weeks after transplantation, the grafts were collected, the ash was removed during the recording period, and the training equipment was embedded. The lines of staining, root elongation, embryo growth and embryo growth are embedded in the thin-cut, thin-cut and thin-cut slices. The roots of the transplanted embryos were generally well elongated, the grafted embryos sprouted from the postnatal 3-year-old embryos, and the grafts of the transplanted embryos were oblique to the heart of the grafts. In the next year, the transplant will pay attention to the migration line, and the migration line will be closed.
项目成果
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