Orbitrap LC-MS/MSを用いた薬毒物スクリーニングとメタボローム解析

使用 Orbitrap LC-MS/MS 进行药物毒理学筛查和代谢组分析

• 批准号: 21K10514
• 负责人: 奥田 勝博
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10514/
• 关键词: Orbitrap LC-MS/MS; メタボローム; 薬毒物スクリーニング; ミックスモードカラム; メタボローム解析; オービトラップ

昨年度までに最適化したLC-MS/MSの分離・分析条件を用いて、司法解剖の鑑定のための薬毒物スクリーニングを行いつつ全質量データを採取し、400例を超えるデータを蓄積した。各事例の死因を一酸化炭素中毒、焼死、薬毒物中毒、海水溺水、淡水溺水、高所転落、頭部外傷、窒息（溺水を除く）、内因性急性心機能不全、青壮年突然死症候群（50歳以下）、偶発性低体温症、敗血症、骨折後数日での死亡に分類し、これらに当てはまらないものや複数の要因が競合すると考えられるものはその他とした。解析にはThermo Fisher Scientific社の低分子 LC-MS ソフトウェア　Compound Discovererを用い、代謝物データベースを用いた網羅的解析に加えて、アミノ酸のみまたは脂肪酸のみに対象を絞った解析などいくつかの方法を試みた。死因によって減少傾向にあるいくつかの化合物が見出されたが、その特異性は完全なものではなかった。一見腐敗の影響はないと認められる試料でも明らかに腐敗アミンの生成が進んでいる試料も多く認められた。解析方法開発時には、これらを客観的に排除するための腐敗マーカーの設定が必要であると考えられた。ソフトを用いた網羅的解析では、ピークの認識等の問題から目視による確認が必須となり、効率的な改善点が多く課題となった。今後もさらにメタボローム解析を続け、死因診断マーカーとなる化合物の発見を目指す。

Last year, we optimized the separation and analysis conditions of LC-MS/MS, and conducted forensic autopsy to identify the toxic substances. We collected 400 samples. The cause of death in each case is classified as acid carbon poisoning, burn, poison poisoning, seawater drowning, fresh water drowning, high fever, head injury, asphyxia (except drowning), internal acute cardiac insufficiency, sudden death syndrome of young adults (under 50 years old), occasional hypothermia, blood poisoning, death days after fracture, etc. Analysis of Thermo Fisher Scientific's low molecular weight LC-MS solution for Compound Discoverer, metabolite profile for use in the analysis of acid and fatty acid profile. The cause of death is a tendency to decrease, and the specificity of the compound is complete. The influence of corruption on the production of samples is recognized. Analysis of the development of the method is necessary to eliminate corruption. The analysis of the problem of the use of the net, the recognition of the problem, the confirmation of the need, the improvement of the efficiency, the problem In the future, the analysis of the cause of death and the detection of the compound will be indicated.

项目成果

液体クロマトグラフ－電場型フーリエ変換質量分析計およびミックスモードカラムを用いた薬毒物スクリーニング法の検討

液相色谱-电场型傅里叶变换质谱仪和混合模式柱的药物筛选方法检验

• 发表时间: 2021
• 作者: 奥田 勝博;浅利 優;髙橋 悠太;森 香苗;難波 亮; 清水 惠子
• 通讯作者: 清水 惠子