Prx2の2つの過酸化型の定量による慢性閉塞性肺疾患COPD診断法の開発

通过定量 Prx2 的两种过氧化形式开发慢性阻塞性肺疾病 COPD 的诊断方法

基本信息

批准号：
20K07166
负责人：
石田洋一
金额：
$ 2.75万
依托单位：
湘南医療大学 (2021-2022)Meiji Pharmaceutical University (2020)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでの研究により、慢性閉塞性肺疾患 (COPD) および閉塞性睡眠時無呼吸症候群 (OSAS) を対象として (コントロールとして健常者)、少ない検体数を用いてPrx2の過酸化状態を調べている。その結果、両疾患の患者赤血球中では、Prx2の過酸化が進行しており、バイオマーカーとして診断に利用できる可能性が考えられた。ただし、COPDとOSASを比較すると、OSASの方が著しい過酸化が起きている可能性が高い。さらにこの事に加えて、医療施設側の事情として、COPDの患者赤血球は、診療上採血を要する機会が少ない、また、COPDよりもOSASの検体の方が収集しやすいことから、2022年度はOSASの解析に注力することとした。OSAS患者群 (N=32)または健常者群 (N=32) の赤血球から全タンパク質を抽出し、抗Prx2抗体または抗Prx2-SO2/3抗体を用いたウエスタンブロッティングにより、Prx2の過酸化度を調べた。その結果、健常者群に比べてOSAS群では、Prx2の過酸化度が著しく増加していることが分かった。また、OSAS群の過酸化型Prx2の測定値は、一般的にOSASの重症度の指標とされている無呼吸低呼吸指数 (AHI) と相関していることが分かった。さらに、OSAS患者群の過酸化型がスルフィン酸型 (-SO2H) とスルホン酸型 (-SO3H) のどちらなのかを明らかにするため、逆相HPLC解析を行った結果、OSAS患者赤血球中のPrx2はスルホン酸型 (-SO3H) 型にまで過酸化が進行していることが明らかとなった。以上の結果、赤血球Prx2の過酸化は、OSASの診断に用いられるバイオマーカーとなる可能性が示唆された。

先前的研究已经使用慢性阻塞性肺疾病（COPD）和阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）（重控制）中的少量标本（重型控制）研究了PRX2的过氧化状态。结果，PRX2过氧化在两种疾病患者的红细胞中都进行了，并且可以认为可以用作诊断作为生物标志物。但是，在比较COPD和OSA时，OSA可能具有更明显的过氧化。此外，除此之外，作为医疗机构的情况，COPD患者的红细胞需要更少的血液收集机会，而OSA样本比COPD更容易收集，因此我们决定专注于2022财年的OSA分析。总蛋白质是从OSAS患者组（N = 32）（n = 32）的PROX（n = 32）的RESAS患者的红细胞中提取的总蛋白质。抗PRX2或抗PRX2-SO2/3抗体。结果，发现与健康组相比，OSA组的PRX2的过氧化水平显着增加。还发现，OSAS组中过氧化PRX2的测量与呼吸暂停指数（AHI）相关，通常被认为是OSAS严重性的指标。此外，为了澄清OSAS患者的过氧化形式是硫酸（-SO2H）还是磺酸（-SO3H），反转 - 相HPLC分析表明，OSAS患者红细胞中的PRX2在OSAS患者的红细胞中发展为磺酸（-SO3H）类型。以上结果表明，红细胞PRX2的过氧化可能是用于诊断OSA的生物标志物。