Is sialic acid recognition receptor a candidate molecule for diagnosis of allergic bronchopulmonary aspergillosis?

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・好酸球上に発現しているシグレックを介したシグナル伝達経路　好酸球に発現しているシグレック-8の細胞内領域にはImmunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif(ITIM)配列がある。シグレック-8のITIM 配列にはシグナル伝達に関与するチロシン(Y)残基が2カ所存在している。今回447番目のチロシンと470番目のチロシンをフェニルアラニン(F)へ変異させた変異体を作製した(Y447F、Y470F、Y447FY470F)。昨年度に同定したシグナル分子とシグレック-8変異体による会合実験の結果より、シグナル分子が会合するシグレック-8のITIM 配列内に存在するチロシン残基を明らかにした。・シグレック-8を恒常的に発現している細胞株の樹立　好酸球の細胞マーカーとしてシグレック-8が存在している。購入可能ながん細胞由来好酸球HL-60 (clone15)では、シグレック-8が発現していないことが報告されている。そのため、本研究ではレトロウィルスを用いてがん細胞由来好酸球HL-60 (clone15)へシグレック-8(野生型)もしくはシグレック-8(シアル酸結合欠損型)を導入した細胞株の樹立を試みた。その結果、シグレック-8(野生型)もしくはシグレック-8(シアル酸結合欠損型)が恒常的に発現している細胞株を樹立することができた。・シグレック-8 (野生型)発現細胞株の糖鎖結合の確認　シグレック-8は糖鎖構造である6’-スルホシアリルルイスXと結合することが明らかになっている。本研究で樹立したシグレック-8(野生型)発現細胞株が6’-スルホシアリルルイスXと結合できるかをフローサイトメトリー法により検討した。その結果、シグレック-8 (野生型)発現細胞株でのみ強く6’-スルホシアリルルイスXと結合することを見出した。