Development of a method for enhancing the antitumor effect and reducing the side effects in therapy for Bladder cancer with Mycobacterium Bovis (BCG) by Macrophage adsorbent

开发一种通过巨噬细胞吸附剂增强牛分枝杆菌（BCG）治疗膀胱癌的抗肿瘤效果并减少副作用的方法

• 批准号: 20K09551
• 负责人: 能見 勇人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09551/
• 关键词: BCG; M1; 腫瘍関連; BCG療法; 尿路上皮癌; 膀胱注入療法; 牛結核菌; マウス; BCGマクロファージ; M1マクロファージ; 腫瘍関連マクロファージ; 膀胱癌; 再発予防; マクロファージ吸着; 腫瘍免疫

膀胱癌に対して実臨床で行われるBCG（牛結核菌）の膀胱注入療法は、再発予防療法では最も有効な治療法であり、また膀胱癌の免疫賦活療法として最も安価な方法であり広く使用されている。しかし、頻尿、排尿時痛、発熱などの副作用が多い点が問題であり、また投与回数も6-8週にわたり毎週1回投与を繰り返すという継続した労力を要するものである。BCGが膀胱癌細胞に直接はたらき細胞障害効果を発揮するのなどの報告も含め、複数の報告がなされるもののBCGの作用機序は未だに明確にはなっていない。我々は、BALB/cマウスの腹腔に移植した腫瘍細胞のMeth A細胞とP815細胞の増殖において、BCGによる免疫賦活が抗腫瘍効果をいかに発現するのか検証している。BALB/cマウスの腹腔内に、BCGとMeth Aを単純同時投与したモデルと、これにBCGをマウス腹腔に先行投与をしたモデル（感作モデル）を比較ところ、感作モデルの方がBCGの抗腫瘍効果が強いが、免疫賦活は1weeks前に単回行うことでも十分な効果があることを確認した。本実験もモデルがBCG療法と近い機序による免疫賦活を行っていることを少なくとも否定しないが、BCG感作回数に関してマウス腹腔と人間の膀胱では単純に相関はしない点は考慮を要するが、基礎的には重要なデータと考え、解析をすすめる方針としている。マウス肥満細胞腫であるP185でも同様に経過を確認している。BCG感作BALB/cマウスの腹腔内にMeth A腫瘍細胞とBCGと同時に移植したモデルの腹腔内に分泌されるINFγについてELAISA法で調査し、IFNγは腫瘍投与後日数を経て上昇することを確認した。FACSを用いた調査からもMφを含む免疫賦活がBCG療法作用機序が中心と考えている。確認のため、BCGが腫瘍に直接作用するか否かもin vitroで並行して検証する予定である。

膀胱癌，BCG（分枝杆菌结核病）是防止复发的最有效疗法，也是对膀胱癌进行免疫临床治疗的最便宜方法，并且被广泛使用。但是，问题在于有许多副作用，例如尿液频繁，排尿期间的疼痛和发烧，剂量的数量需要持续努力，每周重复一次，持续6-8周。尽管已经提出了几份报告，包括BCG直接作用于膀胱癌细胞并发挥细胞毒性作用的报道，但BCG的作用机理仍然不清楚。我们研究了BCG的免疫刺激如何在植入BALB/C小鼠腹膜腔中的肿瘤细胞中甲基A和P815细胞的增殖中发挥抗肿瘤作用。当比较在BALB/C小鼠中简单地将BCG和METH A腹​​膜内施用的模型，以及将BCG预先限制到腹膜腔（敏化模型）的模型时，我们确认，尽管敏化模型具有更强的抗肿瘤效应，但还可以确认免疫效果很强，但在一次性的抗肿瘤效应中也足够了，可以在一周之前进行一次安排。尽管该实验至少没有否认该模型通过类似于BCG治疗的机制进行免疫刺激，但有必要考虑到小鼠腹膜腔与人膀胱之间在BCG敏化数量上没有简单的相关性，但基本上被认为是重要的数据，并且建议进行分析。在P185（小鼠肥大细胞肿瘤）中也证实了该进展。我们使用ELAISA方法在BCG中用METH AB A肿瘤细胞移植的模型研究了腹膜内INFγ分泌的腹膜内腔，该模型在BCG中在BCG中进行了腹膜内腹膜内，并确认IFNγ在肿瘤给药后的几天内增加。使用FACS的研究还表明，包括Mφ在内的免疫刺激是BCG治疗的主要作用机理。为了确认，我们将继续在体外验证BCG是否直接影响肿瘤。

项目成果

マウスのMeth A繊維肉腫細胞に対するBCG療法の効果と機序の検証

卡介苗治疗小鼠Meth A纤维肉瘤细胞的作用及机制验证

• 发表时间: 2021
• 作者: 能見勇人;藤原裕也;加納陽祐;松永知久;前之園良一;吉川勇希;西村一希;内本泰三;上原博史;小村和正;稲元輝生;東 治人
• 通讯作者: 東 治人

マウスのMeth A繊維肉腫細胞に対するBCG療法の効果の検証とその機序の解明について

卡介苗治疗小鼠Meth A纤维肉瘤细胞的效果验证及机制阐明

• 发表时间: 2021
• 作者: 能見勇人;松永知久;前之園良一;堤 岳之;市橋 淳;吉川勇希;谷口俊理;上原博史;小村和正;伊夫貴直和;稲元輝生;東 治人.
• 通讯作者: 東 治人.

腫瘍関連細胞の吸着による抗腫瘍効果の検討

通过吸附肿瘤相关细胞来检验抗肿瘤效果

• 发表时间: 2020
• 作者: 能見勇人;松永 知久;前之園 良一;堤 岳之;平野 一 ;藤原 裕也 ;市橋 淳 ;吉川 勇希;谷口 俊理 ;小村 和正;上原 博史;伊夫貴 直和 ; 稲元 輝生; 東 治人
• 通讯作者: 東 治人