間葉系幹細胞-析出型アパタイト複合体を用いた垂直/水平的大規模顎骨増生法の開発

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バイオミメティクス法を用いてチタンディスク上に各種イオンを含有したアパタイトを析出させ、サンプルの作製を行った。前年までの実験の結果から各種イオンの含有比（カルシウム：各種イオン比＝80：1）を決定した。本比率でマンガン、コバルト、銅含有アパタイトを析出させたサンプルと、コントロールとしてアパタイトのみを析出させたサンプル、およびアパタイトを析出させていないチタンディスクを用いて実験を行った。購入したヒト腸骨骨髄由来間葉系幹細胞（Mesenchymal stem cell：MSC）を5000cells/cm2でサンプル上に播種し、10％ウシ胎児血清、1％抗生物質を含有したαMEM培地にて培養した。細胞播種から24時間、48時間、72時間後にWST-1 assayを行い、細胞増殖能の検討を行った。アパタイトを析出させていないチタンディスクと比較するとマンガン、コバルト、銅いずれのサンプルも細胞増殖能の抑制がみられた。またアパタイトのみを析出させたサンプルと比較するとマンガンのみに細胞増殖能の抑制がみられた。次いでこれらのサンプル上にMSCを5000cells/cm2で播種し、一週間培養した後に骨分化誘導を行い、石灰化能への影響をALP活性定量およびアリザリンレッド染色にて検討した。パイロットスタディの結果では、各種サンプルとアパタイトを析出させていないチタンディスクおよびアパタイトのみを析出させたサンプルとの間に差はみられなかったが、全体的に骨分化の程度が低かったため、改めて検討が必要と考えられた。今後も試行回数を増やして各種イオン含有アパタイトの骨分化能への影響を検討する。