ヒトメタニューモウイルスによる宿主自然免疫ハイジャック機構の解明

これまでの長年の研究により、多数のインターフェロン誘導因子（ISG）が同定、報告されている。これらのISGの主要な機能としては抗ウイルス作用や抗癌作用が良く知られており、ウイルス学分野におけるISGの研究はISGの抗ウイルス作用に着目したものが大半であった。しかし、ISGは多岐に渡っており（数百種類以上）、抗ウイルス機能、抗癌機能以外の機能を有するISGも複数報告されており、ウイルス感染においても、ISGが果たす役割は抗ウイルス作用だけでは無い可能性がある。本研究では最新の遺伝子編集技術（CRISPR/CAS9システム）を用いて作成したゲノムワイドノックアウト細胞ライブラリー、及びISG発現ベクターライブラリーを用いて、ヒトメタニューモウイルス（HMPV）の感染・増殖を増強する、ISGを同定することを目的としている。3年目である本年度には、これまでにHeLa細胞より作出したゲノムワイドノックアウト細胞ライブラリーを用いて同定されたHMPVの感染・増殖に必要な宿主因子に関して詳細な解析を進めた。特に増殖に必要と思われる宿主因子に関して、個別のノックアウト細胞を作出し、HMPVの感染に与える影響を評価し、一部のISGは当初想定の通り、HMPVの感染・増殖を特異的に増強することを明らかにした。また、ISGに加えて、HMPVの宿主細胞への接着・吸着に関連する宿主因子も複数同定しており、これらの宿主因子に関する解析を進め、HMPVの宿主細胞への接着・吸着の際に必要とされる宿主因子の微細構造についても同定する予定である。

これまでの長年の研究により、多数のインターフェロン誘導因子（ISG）が同定、報告されている。これらのISGの主要な機能としては抗ウイルス作用や抗癌作用が良く知られており、ウイルス学分野におけるISGの研究はISGの抗ウイルス作用に着目したものが大半であった。しかし、ISGは多岐に渡っており（数百種類以上）、抗ウイルス機能、抗癌機能以外の機能を有するISGも複数報告されており、ウイルス感染においても、ISGが果たす役割は抗ウイルス作用だけでは無い可能性がある。本研究では最新の遺伝子編集技術（CRISPR/CAS9システム）を用いて作成したゲノムワイドノックアウト細胞ライブラリー、及びISG発現ベクターライブラリーを用いて、ヒトメタニューモウイルス（HMPV）の感染・増殖を増強する、ISGを同定することを目的としている。3年目である本年度には、これまでにHeLa細胞より作出したゲノムワイドノックアウト細胞ライブラリーを用いて同定されたHMPVの感染・増殖に必要な宿主因子に関して詳細な解析を進めた。特に増殖に必要と思われる宿主因子に関して、個別のノックアウト細胞を作出し、HMPVの感染に与える影響を評価し、一部のISGは当初想定の通り、HMPVの感染・増殖を特異的に増強することを明らかにした。また、ISGに加えて、HMPVの宿主細胞への接着・吸着に関連する宿主因子も複数同定しており、これらの宿主因子に関する解析を進め、HMPVの宿主細胞への接着・吸着の際に必要とされる宿主因子の微細構造についても同定する予定である。