ヒトメタニューモウイルスによる宿主自然免疫ハイジャック機構の解明

阐明人偏肺病毒对宿主先天免疫劫持机制

• 批准号: 20K16270
• 负责人: 直 亨則
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K16270/
• 关键词: ヒトメタニューモウイルス; インターフェロン誘導遺伝子; 自然免疫

これまでの長年の研究により、多数のインターフェロン誘導因子（ISG）が同定、報告されている。これらのISGの主要な機能としては抗ウイルス作用や抗癌作用が良く知られており、ウイルス学分野におけるISGの研究はISGの抗ウイルス作用に着目したものが大半であった。しかし、ISGは多岐に渡っており（数百種類以上）、抗ウイルス機能、抗癌機能以外の機能を有するISGも複数報告されており、ウイルス感染においても、ISGが果たす役割は抗ウイルス作用だけでは無い可能性がある。本研究では最新の遺伝子編集技術（CRISPR/CAS9システム）を用いて作成したゲノムワイドノックアウト細胞ライブラリー、及びISG発現ベクターライブラリーを用いて、ヒトメタニューモウイルス（HMPV）の感染・増殖を増強する、ISGを同定することを目的としている。3年目である本年度には、これまでにHeLa細胞より作出したゲノムワイドノックアウト細胞ライブラリーを用いて同定されたHMPVの感染・増殖に必要な宿主因子に関して詳細な解析を進めた。特に増殖に必要と思われる宿主因子に関して、個別のノックアウト細胞を作出し、HMPVの感染に与える影響を評価し、一部のISGは当初想定の通り、HMPVの感染・増殖を特異的に増強することを明らかにした。また、ISGに加えて、HMPVの宿主細胞への接着・吸着に関連する宿主因子も複数同定しており、これらの宿主因子に関する解析を進め、HMPVの宿主細胞への接着・吸着の際に必要とされる宿主因子の微細構造についても同定する予定である。

通过多年的研究，已经确定并报告了许多干扰素诱导因素（ISG）。这些ISG的主要功能以其抗病毒和抗癌特性而闻名，并且大多数关于ISG在病毒学领域的研究都集中在ISG的抗病毒作用上。但是，有许多ISG（超过数百个），并且多个ISG具有抗病毒和抗癌功能以外的功能，ISG在病毒感染中的作用可能不仅是其抗病毒作用。这项研究旨在确定使用最新基因编辑技术（CRISPR/CAS9系统）和ISG表达矢量库创建的全基因组基因敲除细胞库，从而增强人元病毒（HMPV）的感染和增殖。在今年，第三年，我们对HMPV感染和增殖所必需的宿主因子进行了详细分析，这些因素是使用HeLa细胞产生的全基因组敲除细胞库鉴定的。特别是，关于似乎是增殖所必需的宿主因素，我们产生了单个基因敲除细胞并评估了对HMPV感染的影响，并揭示了某些ISG特异性增强了HMPV感染和增殖，如最初预期的那样。除ISG外，我们还确定了与HMPV对宿主细胞的粘附和吸附有关的多种宿主因素，我们计划继续分析这些宿主因素，并确定HMPV对宿主细胞的粘附和吸附所需的宿主因子的微观结构。

项目成果

Recent molecular evolution of human metapneumovirus and subdivision of A2 subtype

人类偏肺病毒的最新分子进化和A2亚型的细分

• 发表时间: 2021
• 作者: 2.Nao N;Saikusa M;Sato K;Sekizuka T;Usuku S;Tanaka N;Nishimura H;Takeda M
• 通讯作者: Takeda M