The elucidation of regulatory mechanisms of glucagon secretion through HSP72 in pancreatic alpha cells.

阐明胰腺 α 细胞中 HSP72 胰高血糖素分泌的调节机制。

• 批准号: 20K16526
• 负责人: 北野 さやか
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K16526/
• 关键词: 糖尿病; 膵α細胞; グルカゴン; 細胞内ストレス; HSP72; 糖新生

膵α細胞特異的HSP72発現マウスの作成Tet-on調節プラスミドを組み込んだTgマウス、及びTet-on応答プラスミドを組み込んだTgマウスを作成。それぞれを交配し、Tet-HIP(+/-)/TRE-HSP72(+/-)/HSP72(-/-)を得ている。Tet-on systemはドキシサイクリン存在下で目的遺伝子を発現するシステムである。リバーステトラサイクリントランスアクチベーターにDOXが結合すると、応答因子のTREに結合し目的遺伝子の転写が促進される。また、DOXを除去することで転写を止めることもできる。調整、応答プラスミドが機能するかどうかの確認は細胞実験を用いて行った。プラスミドをLipofectaminで導入後にドキシサイクリンを導入し、HSP72の発現を確認した。Tet-HIP + TRE-HSP72のプラスミド及びドキシサイクリンを負荷すると、HSP72の発現が上昇しHIP-promoterが正常に作用することが分かった。

Cui alpha cells specific HSP72 発 now マ ウ ス の made Tet - on regulating プ ラ ス ミ ド を group み 込 ん だ Tg マ ウ ス and び Tet - on 応 answer プ ラ ス ミ ド を group み 込 ん だ Tg マ ウ ス を do it. そ れ ぞ れ を し mating, Tet - HIP (+ / -)/TRE - HSP72 (+ / -)/HSP72 (- / -) を て い る. The 伝 offspring を of the で target present するシステムである under the existence of the Tet-on system リ ドキシサ リ リ リ. リ バ ー ス テ ト ラ サ イ ク リ ン ト ラ ン ス ア ク チ ベ ー タ ー に DOX が combining す る と, 応 answer factor の TRE に combining し purpose heritage 伝 son の planning write が promote さ れ る. ま た, DOX を remove す る こ と で planning write を check め る こ と も で き る. Adjust, 応 answer プラス, プラス, ドが function する, <s:1>, う, <s:1> confirm を cell experiment を use て て to perform った. プ ラ ス ミ ド を Lipofectamin で after import に ド キ シ サ イ ク リ ン を import し, HSP72 の 発 を now confirmed し た. Tet - HIP + TRE - HSP72 の プ ラ ス ミ ド and び ド キ シ サ イ ク リ ン を load す る と, HSP72 の 発 now rising が し HIP - promoter が normal に す る こ と が points か っ た.

项目成果

膵α細胞におけるHeat Shock Protein 72(HSP72)の関与.

热休克蛋白 72 (HSP72) 参与胰腺 α 细胞。

• 发表时间: 2020
• 作者: 渡邊拓郎;近藤龍也，宮川展和，吉積臨太郎，北野さやか，井形元維，河島淳司，瀬ノ口隆文，松村剛，荒木栄一
• 通讯作者: 近藤龍也，宮川展和，吉積臨太郎，北野さやか，井形元維，河島淳司，瀬ノ口隆文，松村剛，荒木栄一