蛍光活性化タンパク質を用いたB型肝炎ウイルス検出系の構築とその応用

荧光激活蛋白乙型肝炎病毒检测系统的构建及其应用

• 批准号: 20K17042
• 负责人: 姫野 美沙緒
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17042/
• 关键词: B型肝炎ウイルス; レポーターウイルス; 肝硬変; 抗ウイルス薬; レポーター; 抗HBV薬; B型肝炎ウイルス(HBV); 抗HBV薬スクリーニング; 肝非実質細胞; iPS細胞; 三次元培養

本研究では蛍光活性化タンパク質（Y-FAST）を用いたB型肝炎ウイルス（HBV）検出系の構築とその応用を目指す。前年度までに完成させたY-FASTを導入した組換えウイルスの感染効率やウイルス産生量が高くないことが明らかとなったため、当該年度においては組換えウイルスを恒常的に発現するウイルスの産生を計画した。現在も恒常発現株の作製を進めている。また細胞を培養器から遊離させず検出する際の方法についても検討を行った。さらに本研究の蛍光活性化タンパク質を用いたHBVレポーター系を用いたウイルス検出システムの評価や収量の向上に資するため、各種新規合成化合物を添加した場合のHBV複製レベル変動について試験を行った。その結果、細胞死のない濃度でHBV複製レベルを抑制する新規化合物や、HBVの細胞外放出を抑制すると考えられる新規化合物を見出した。

The present study is intended to provide guidance for the construction and use of hepatitis B virus (HBV) detection systems in the context of photoactive protein (Y-FAST). In the previous year, Y-FAST was introduced, and the infection rate was high. In the current year, Y-FAST was introduced, and the infection rate was constant. Now it is common to see the plant's production system advancing. The method of cell culture in vitro is discussed. In addition, the use of the photoactivated DNA molecule in this study, the use of the HBV ELISA system, the evaluation of the system and the improvement of the yield of the system, and the changes in HBV replication in situations where various new synthetic compounds are added will be tested. The results showed that the new compounds inhibit HBV replication at cell death concentrations and inhibit HBV extracellular release.

项目成果

iPS細胞から肝類洞壁細胞への分化誘導法

诱导iPS细胞分化为肝窦细胞的方法

• 发表时间: 2021
• 作者: 姫野美沙緒;木戸丈友
• 通讯作者: 木戸丈友

Co-culture Model for Hepatitis B Virus Infection Using iPSC-Derived Liver Progenitor Cells and Liver Sinusoidal Endothelial Cells

使用 iPSC 来源的肝祖细胞和肝窦内皮细胞的乙型肝炎病毒感染共培养模型

• DOI: 10.1007/978-1-0716-2557-6_7
• 发表时间: 2022
• 期刊: Methods in Molecular Biology
• 作者: Misao HIMENO;Shin-Wei Chen;Taketomo Kido
• 通讯作者: Taketomo Kido

マイケルアクセプターを有するアルカロイド類似化合物群の骨格多様化合成による抗B型肝炎ウイルス活性分子の創製

迈克尔受体类生物碱化合物骨架多样化合成抗乙型肝炎病毒活性分子

• 发表时间: 2023
• 作者: 金子信人;久保田大貴;姫野美沙緒;木戸丈友;宮島 篤;大栗博毅
• 通讯作者: 大栗博毅

B型肝炎ウイルスの感染・複製を阻害するアルカロイド類似化合物の探索

寻找抑制乙型肝炎病毒感染和复制的生物碱类化合物

• 发表时间: 2021
• 作者: 姫野 美沙緒;木戸 丈友;久保田大貴;大栗博毅;宮島 篤
• 通讯作者: 宮島 篤

Modulation of hepatitis B virus infection by epidermal growth factor secreted from liver sinusoidal endothelial cells

• DOI: 10.1038/s41598-020-71453-5
• 发表时间: 2020-09-01
• 期刊: SCIENTIFIC REPORTS
• 影响因子: 4.6
• 作者: Chen, Shin-Wei;Himeno, Misao;Kido, Taketomo
• 通讯作者: Kido, Taketomo