Mechanism of Chronic Inflammation of Tenocyte and Tendon through Transient Receptor Potential Channels

瞬时受体电位通道导致肌腱细胞和肌腱慢性炎症的机制

• 批准号: 20K18036
• 负责人: 亀田 拓哉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18036/
• 关键词: tendinopathy; TRP; inflammation; tendon; TRPA1

弾発指、上腕骨外側上顆炎、肩関節腱板炎、アキレス腱炎などの腱障害は日常診療で頻繁に遭遇するが、根本的な薬物治療はない。Transient Receptor Potential チャネル(以下TRPs)は様々な環境に反応し、細胞内Ca濃度を上昇させることで、下流にある細胞応答を引き起こす役割を持つ。本研究では腱障害においてTRPチャネルがどのように慢性炎症に関与しているのかを解明する。R2年度では、ヒト腱細胞を購入し、培養が可能であることを確認できた。R3年度では、実験計画の実験Ⅰに相当する手順として、培養した腱細胞にサイトカインを暴露させ、その細胞群からRNA抽出を行い、リアルタイムPCR法を行うことで、標的遺伝子であったTRPs、特にTRPA1の発現が有意に高いことが明らかとなった。更に、TRPA1を作動させる物質を炎症性サイトカインと組み合わせて添加した細胞群からRNA抽出を行い、リアルタイムPCR法を行うことで、細胞外基質の就職遺伝子が変化する事をとらえたため、TRPA1の作動が、炎症によって引き起こされる細胞外基質の変化を修飾する事が示唆された。また、手術の破棄検体からヒト腱細胞を分離、培養する手順について、一般倫理委員会に承認を得た上で、実際に分離培養が可能となり、5検体を収集した。R4年度では、さらに検体数を増やし、7検体を収集できた。炎症下におけるヒト腱細胞を免疫染色し、TRPA1タンパク発現が増強していることを確認した。さらにTRPA1を作動させる物質を炎症性サイトカインと組み合わせる実験系で、ELISA法により、培養液中の細胞外基質を変化させるタンパクが変動する事をとらえた。また、ヒト腱細胞におけるCaイオン流入が、炎症環境下においてのみ、TRPA1作動物質により引き起こされることをとらえられた。以降の動物実験のための倫理委員会の申請を行った。

Inflammation of the lateral upper carpal bone, inflammation of the tendon plate of the shoulder joint, アキレス tendinitis な <s:1> and <s:1> of the Achilles tendon obstruction <e:1>. Daily diagnosis and treatment で frequently に encounter するが, fundamental な drug treatment <e:1> な な. Transient Receptor Potential チ ャ ネ ル (" は TRPs) others 々 に な environment anti 応 し rising, concentration of intracellular Ca を さ せ る こ と で, obscene に あ る cell 応 answer を lead き こ つ す "を cutting. This study で は tendon handicap of に お い て TRP チ ャ ネ ル が ど の よ う に chronic inflammation に masato and し て い る の か を interpret す る. In R2, the purchase of で で and ヒト tendon cells を, as well as their culture が, may confirm で とを とを とを とを and で. R3 annual で は, be 験 project の be 験 Ⅰ に quite す る hand shun と し て, cultivating し た tendon cells に サ イ ト カ イ ン を exposed さ せ, そ の cells か ら RNA extraction を い, リ ア ル タ イ ム PCR method line を う こ と で, mark but 伝 で あ っ た TRPs, に TRPA1 was の 発 now が intentionally に high い こ と が Ming ら か と な っ た. More に, TRPA1 was を actuation さ せ る material を inflammatory サ イ ト カ イ ン と group み close わ せ て add し た cells か ら RNA extraction を い, リ ア ル タ イ ム PCR method line を う こ と で, extracellular matrix の inauguration but 伝 が variations change す る matter を と ら え た た め, TRPA1 was の actuation が, inflammation に よ っ て lead き up こ さ れ る extracellular matrix Quality を modification する event が indication された. ま た, surgical の abandoned 検 body か ら ヒ ト を す were isolated and cultured tendon cells る hand shun に つ い て, general ethics committee に recognise を た で, be interstate に が cultivation could と な り, 5 検 を 収 set し た. In the R4 year, the number of で さらに検 and さらに検 bodies を increased や を, and 7検 bodies を were published で た た た. Inflammation under に お け る ヒ ト tendon cells を immune dyeing し, TRPA1 was タ ン パ ク 発 が now raised strong し て い る こ と を confirm し た. さ ら に TRPA1 was を actuation さ せ る material を inflammatory サ イ ト カ イ ン と group み close わ せ る be 験 で, ELISA method に よ り, medium, の extracellular matrix を variations change さ せ る タ ン パ ク が - move す る matter を と ら え た. ま た, ヒ ト tendon cells に お け る Ca イ オ ン inflows が, inflammation environment に お い て の み, TRPA1 was actuation に よ り lead き up こ さ れ る こ と を と ら え ら れ た. From now on, the <s:1> Animal Experiment ため ため ethics committee applies for を to conduct った.

项目成果

ヒト腱細胞におけるTRPsチャネルと炎症の関連

TRPs通道与人肌腱细胞炎症的关系

• 发表时间: 2023
• 作者: 福間 裕子;徳永 琢也;井手尾 勝政;谷村 峻太郎;唐杉 樹;宮本 健史;横田 武尊
• 通讯作者: 横田 武尊