低出力超音波パルス照射による骨形成促進機序の解明

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低出力超音波パルス(LIPUS)照射の初期に、ラット骨髄細胞由来の骨芽細胞で顕著に発現する遺伝子を明らかにすることを本研究の目的とした。方法:ラット (8週齢、雄、Sprague-Dawleyラット)から骨髄細胞を入手し、骨形成培地に懸濁して細胞培養液を調製した。細胞培養1-4日目に1日15分、細胞培養プレートの 底からLIPUSを照射した(LIPUS群)。LIPUSの照射条件は3MHz、40mW/cm2とした。コントロール群はLIPUS照射せず、LIPUS群と同様の培養を行った。培養14日目 に、石灰化を評価するためにアリザリンレッドS染色を行った。培養4日目に、total RNAを抽出し、マイクロアレイスライドにハイブリダイゼーションし、得られたデータを解析した。LIPUS群で発現が増加した遺伝子については、パスウェイ解析を行った。結果:アリザリンレッドSで染色した細胞面積は、LIPUS群でコントロール群に比べ有意に大きくなっていた。LIPUS照射した群では、II型インターフェロンシグナルに関連する遺伝子、軟骨内骨化に関する遺伝子 の発現が増加した。これらの結果を学術論文に投稿し受理されている。