遊走誘導型CARによる脳疾患治療基盤技術の開発

开发利用迁移引导的CAR治疗脑疾病的基础技术

基本信息

项目摘要

昨年度は、遊走誘導型キメラ抗原受容体として、細胞外ドメインに一本鎖抗体、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインにケモカイン受容体もしくは増殖因子受容体を配したコンストラクトを構築し、細胞で安定発現させた。トランスウェル遊走アッセイによる間接的な遊走活性評価を行った結果、増殖因子受容体を用いた遊走誘導型キメラ抗原受容体の方が抗原に応答して高い遊走活性を有していた。本年度は、より直接的に遊走活性を評価する系の構築を目指した。遊走誘導型キメラ抗原受容体発現細胞をマルチウェルプレートに播種し、抗原を添加後に細胞が沈降するのを待ち、インキュベータ内に設置した顕微鏡でタイムラプス撮影を行った。撮影した画像を時系列順に繋げて動画を作成し、細胞形態の経時的な変化を可視化した。その結果、抗原を添加しない場合には、観察時間を通して細胞が比較的丸い形状のままであったのに対して、抗原を添加した場合には、観察時間中に細胞が仮足を伸ばして変形しており、運動性が亢進していることが示された。この抗原依存的な細胞の変形は、トランスウェル遊走アッセイの結果と相関した。以上より、細胞の形態観察による遊走活性の評価系を新たに構築することができた。
In the past year, migration induced antigen receptors, extracellular receptors, an intrinsic antibody, membrane penetration receptors, intracellular receptors, and proliferation factor receptors were constructed and stable cells were developed. The results of indirect migration activity evaluation showed that the receptor of growth factor was used in the migration induced antigen receptor and the antigen was used in the migration induced antigen receptor. This year, the direct activity of the mobile phone system was evaluated. The migration induced antigen receptor producing cells were seeded and the antigen was added to the cells to be sedimented. A series of images are created in sequence, and cell morphology is visualized in sequence. In the case of antigen addition, the observation time passes, and the cells are compared with each other. In the case of antigen addition, the cells are compared with each other. In the case of observation time, the cells are stretched, and the motility is increased. The antigen-dependent cell morphology is correlated with the results of migration. A new system for evaluating the activity of migration in cells is proposed.

项目成果

期刊论文数量(38)
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次世代創薬研究について
关于下一代药物发现研究
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    平尾佳那絵;佐々木成朗;河原正浩
  • 通讯作者:
    河原正浩
細胞内蛋白質間相互作用検出法KIPPISの開発
开发 KIPPIS,一种检测细胞内蛋白质-蛋白质相互作用的方法
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    河原正浩;鹿島大揮
  • 通讯作者:
    鹿島大揮
細胞創製時代のバイオ計測
细胞创造时代的生物测量
  • DOI:
    10.34565/seibutsukogaku.99.6_291
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kogawa Masato;Nishikawa Yohei;Saeki Tatsuya;Yoda Takuya;Arikawa Koji;Takeyama Haruko;Hosokawa Masahito;河原正浩
  • 通讯作者:
    河原正浩
チロシンキナーゼ内包型デザイナー受容体の開発
含有酪氨酸激酶的设计受体的开发
  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    河原正浩;コンクローントーン タットポーン
  • 通讯作者:
    コンクローントーン タットポーン
Ras/MAPK経路に着目した細胞内蛋白質間相互作用検出法SOLISの開発
开发 SOLIS,一种检测细胞内蛋白质-蛋白质相互作用的方法,重点关注 Ras/MAPK 通路
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    河原正浩;鹿島大揮
  • 通讯作者:
    鹿島大揮
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河原 正浩其他文献

Synthetic engineering of signalobodies for versatile regulation of cellular fates
用于细胞命运多功能调节的信号体合成工程
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    河原 正浩;江口 晃弘;河原 正浩;Masahiro Kawahara;Masahiro Kawahara;Masahiro Kawahara
  • 通讯作者:
    Masahiro Kawahara
細胞死受容体を利用した結合部位特異的抗体選択系の構築
使用细胞死亡受体构建结合位点特异性抗体选择系统
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    河原 正浩;江口 晃弘
  • 通讯作者:
    江口 晃弘
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细胞内信号传导的合成生物工程
  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    コンクローントーン タットポーン;長棟 輝行;河原 正浩;Masahiro Kawahara;河原 正浩;河原 正浩;河原 正浩
  • 通讯作者:
    河原 正浩
増殖を指標とした動物細胞内蛋白質間相互作用スクリーニング法
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    河原 正浩;鹿島 大揮;景岡 美穂;間部 悟;長棟 輝行
  • 通讯作者:
    長棟 輝行
動物細胞での抗体選択・生産一貫システムの開発(抗体医療の最前線)
开发利用动物细胞进行抗体选择和生产的综合系统(抗体医学的最前沿)
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    長棟 輝行

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    17760619
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 10.98万
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    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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  • 财政年份:
    2020
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  • 项目类别:
Walk this way: leveraging of a unique skeletal muscle that is resistant to ischemic injury
沿着这条路走:利用独特的抗缺血性损伤的骨骼肌
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  • 资助金额:
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知道了