权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Search for enzymes and regulators involved in structural changes in steroid compounds that support insect molting and metamorphosis

寻找参与支持昆虫蜕皮和变态的类固醇化合物结构变化的酶和调节剂

基本信息

批准号：
21H02129
负责人：
片岡宏誌
金额：
$ 11.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題の目的（1）から（3）に従って、2022年度の研究実績を以下に記す。1）カイコの腸管には植物ステロールからコレステロールに変換する酵素群が存在することが分かっている。植食性の昆虫において、この変換反応が同様に生じているかを検討した。これまで、In vitroの系で、再構築ができているがその効率が非常に低かった。その後、超遠心分離にてミクロソーム画分に変換活性が認められているものの、カラムクロマトグラフィーに供するとその活性が消失してしまうため、補酵素あるいは複合体を形成している酵素であることが予想できた。一方、コオロギを用いた、同様の植物ステロールの変換活性は、これまでにSbovodaにより推定されていた変換反応は認められなかったものの、別経路での変換を示唆するデータが得られた。2）2021年度では、LC-MS/MSのトラブルにより研究が進まなかった。2022度では、LC-MS/MSの他にもGCMSの利用ができるかを検討した。感度に差があるものの、GCMSによるステロール化合物を得ることができた。一方、世界的なヘリウムガスの供給不足により、GCMSによる分析も滞っていたが、ヘリウムガスの代替ガスを検討しているところ、窒素による系が比較的安定にデータが得られ見通しが立てられるようになった。3）分析技術に依存している本研究課題は、これまでのLC-MS/MSやGC-MSなどのデータや先行文献値などをもとに、ステロール化合物の代謝および変換経路の中間体を探索することを試みた。ステロール代謝を予想できるような化合物は見出せなかったが、24メチレンコレステロールなど、有力な候補代謝化合物は見出すことができた。構造変換の上位のペプチド性因子に関してはスクリーニングにはいたらないものの、2021年度のデータをもとにゲノム情報の比較により網羅的に抽出できた。

The purpose of this project (1) and (3) are as follows. The research achievements in 2022 are as follows. 1) Intestinal tube には plant ステロールからコレステロールに変change するenzyme group がexistent することが分かっている. Herbivorous insects are において, and この変change 远が同様に生じているかを検question した.これまで、In vitroの systemで、Reconstructed ができているがそのefficiencyがvery low かった. After その, super telecentric separation にてミクロソームdrawing points に変change activityが见められているものの、カラムクロマトグラフィーにThe active enzyme disappears and the enzyme complex is formed. One party, コオロギを用いた, same 様のplant ステロールの変change active は, これまでにSbovodaによりIt is presumed that されていた変changes 远はcognizes められなかったものの, and bie経路での変changes をshows 唆するデータがgets られた. 2) In 2021, LC-MS/MS research and development projects will be conducted. 2022℃, LC-MS/MS, GCMS, GCMS, LC-MS/MS. The sensitivity is different and the GCMS is the same as the compound. On one side, the world's なヘリウムガスの insufficiency supply により, GCMS による analysis stagnant っていたが, ヘリウムガスの substitute The comparative security of ガスを検検しているところ and 绹素による煌定にデータが得られ见通しが立てられるようになった. 3) Analytical technology depends on the subject of this research: LC-MS/MS and GC-MS Prior literature 値などをもとに, ステロールCompound のmetabolism および変change 経路のIntermediate をExploration することをtrial みた.ステロール METABOLIZATION を I want to think about the できるような compound は见出せなかったが、24メチレンコレステロールなど, 力な candidate metabolic compound は见出すことができた. Structural transformation of the upper level of the sex factorの、2021 のデータをもとにゲノムInformation のComparison により䁫出できた.