Development of therapeutic strategies for the realization of tumor suppressive microRNA replacement therapy for refractory solid tumors

开发治疗策略以实现难治性实体瘤的抑癌性microRNA替代疗法

基本信息

批准号：
21H02992
负责人：
谷口高平
金额：
$ 11.15万
依托单位：
Osaka Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02992/
关键词：
microRNA 核酸医薬ドラッグデリバリーシステム切除不能 miRNA 創薬化学修飾

项目摘要

本年度は、大腸癌骨盤内再発モデルに対して、化学修飾型miRNA-143をリポフェクションで全身投与（尾静脈投与）する動物実験を中心に進めた。結果として、化学修飾型miRNA投与群で、有意な抗腫瘍効果を認めた。投与後の解析では、腫瘍中のmiRNA-143発現の上昇を認め、組織切片では腫瘍内および辺縁にmiRNA-143の集積を認めた。このことから抗腫瘍効果はmiRNAの投与により生じたということが示唆された。さらに抗腫瘍効果の機序を明らかにするため、miRNA投与後の腫瘍切片を用いてプロテオーム解析を実施し、標的遺伝子Xを同定した。miRNA-143とXの関係性および、Xの機能について詳細な検討を進める計画である。一方、細胞内還元環境を利用した新たなDDS開発については、ゲル粒子キャリアとプロドラッグ型miRNAの作製を進めた。ゲル粒子キャリアは、予備検討が進み、次年度には細胞導入実験を実施できる状況に至っている。既に導入に使用するmiRNAも選定しており、一部の実験を開始している。プロドラッグ型miRNAの作製に関しては、これまで、鋭敏な抗腫瘍効果は認めることを明らかにしているものの、化学修飾型miRNAの作製に苦戦しているmiRNA-145に照準を絞った。本年度は、化学修飾を付加する位置を決定するために2'-O-メチルを用いた修飾位置の最適化の検討等を実施し、適切な修飾付加の位置が決定しつつある。

今年，我们专注于动物实验，其中化学修饰的miRNA-143在通过脂肪触发的骨盆复发模型中系统地给予（尾静脉给药）。结果，在施用化学修饰的miRNA的组中观察到了显着的抗肿瘤作用。给药后的分析显示，肿瘤中miRNA-143表达增加，组织切片显示miRNA-143在肿瘤和边缘边缘的积累。这表明抗肿瘤作用是由miRNA的给药引起的。 To further clarify the mechanism of antitumor effects, proteomic analysis was performed using tumor sections after miRNA administration to identify target gene X. The plan is to proceed with detailed consideration of the relationship between miRNA-143 and X and the function of X. On the other hand, regarding the development of new DDSs using the intracellular reduction environment, we proceeded with the production of gel particle carriers and prodrug-type miRNAs.对凝胶颗粒载体的初步研究已经进行，并且可以在明年进行细胞引入实验。已经选择了用于介绍的miRNA，并且一些实验已经开始。关于前药miRNA的产生，尽管已经揭示了它具有敏感的抗肿瘤效应，但我们集中在miRNA-145上，MiRNA-145正在努力产生化学改良的miRNA。今年，我们使用2'-O-甲基对修饰位置的优化进行了调查，以确定要添加化学修饰的位置，并确定了适当的修改位置。