LAP依存性組織リモデリングによる歯周組織再生医療の新機軸

利用LAP依赖性组织重塑在牙周组织再生医学中取得新突破

• 批准号: 21H03118
• 负责人: 竹立 匡秀
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03118/
• 关键词: 歯周組織再生; 脂肪組織由来多系統前駆細胞; efferocytosis; LAP

本研究課題では、アポトーシス細胞貪食機能であるefferocytosisとLAPという組織恒常性維持機構を「能動的再生誘導因子」として捉えることで、脂肪組織由来多系統前駆細胞（ADMPC）移植による組織再生過程の分子メカニズムを組織リモデリングの観点から解明することを目的として研究を遂行している。令和4年度は、令和3年度に確立したラット歯周組織欠損に対する同種ADMPC移植モデルを用いた組織学的解析から歯周組織局所において移植ADMPCをefferocytosisする細胞の同定を試みた。結果、ADMPC周囲にマクロファージの集積が観察されたものの、実行細胞同定には研究手法に限界があることが明らかとなった。そこで計画の一部を変更し、令和3年度に実施した結果から、歯周組織に移植した同種ADMPCは移植後2週間程度でアポトーシスすることが示唆されたため、移植細胞のアポトーシスが組織再生に及ぼす影響を検討するためにアポトーシス抵抗性ADMPCを作製した。すなわち、アポトーシス抵抗性分子であるBcl-2を、レンチウイルスを用いてGFPラット由来ADMPCに遺伝子導入後、薬剤耐性によるセレクションによりstable発現細胞を作製した。その後、Bcl-2の発現量を確認後、caspase発現を指標として機能をin vitroにて検証した。一方で、ラット骨髄からマクロファージを誘導し、アポトーシスを誘導したADMPCと共培養することによりin vitroにおけるefferocytosisをタイムラプス解析した。結果、共培養24時間後から48時間後に活発なefferocytosisが観察された。さらにADMPCをefferocytosisしたマクロファージの細胞特性を解析するために、共培養後の表面抗原の発現変化をFACSにて明らかにした。

The aim of this study is to determine the mechanism of tissue homeostasis, the active regenerative factor, and the origin of multi-system progenitor cell (ADMPC). In this study, we have studied the process of tissue regeneration in the process of tissue regeneration. The analysis of the histology of the transplantation of the same ADMPC in 2004, 2008 and 3 is the same as that of the organization in 2004, 2004 and 2003. The organization of the organization conducted the same test of transplanting ADMPC efferocytosis cells. Results: the results showed that the research methods were determined in the same way, and the research methods were determined in the same way. The results showed that the research methods were the same as those in ADMPC. The whole program was designed to compare the results of one program, the order and the third year, and the tissue transplant was conducted 2 years after the same ADMPC transplantation. after 2 years of transplantation, the tissue tissue regeneration test was performed, and the tissue regeneration test was performed. The results showed that the ADMPC resistance test was performed. The resistance molecules are known to be Bcl-2, and the resistance molecules are known to be linked to stable. After they have been introduced with the derived ADMPC gene, the cells in the cell will be linked to each other. After the operation, after the Bcl-2 check is correct, the caspase shows that the machine is capable of operating the in vitro machine. On the other hand, the ADMPC was co-cultured, and the in vitro was analyzed. The efferocytosis was analyzed. Results: after 24 hours of incubation, 48 hours after 48 hours, the samples were examined by efferocytosis. The characteristics of the cells were analyzed by ADMPC, efferocytosis, and FACS after co-culture.

项目成果

Carbonate apatite as a scaffold for periodontal regeneration cell therapy

碳酸盐磷灰石作为牙​​周再生细胞治疗的支架

• 发表时间: 2022
• 作者: Kawasaki K; Takedachi M; Sawada K; Morimoto C; Hirai A; Shimomura J; Murata M; Kawakami K; Miki K; Takeshita N; Sakura K; Matsuyama A; Okura H; Kitamura M; Murakami S
• 通讯作者: Murakami S