プリンヌクレオシドによる新規歯槽骨代謝制御機構のin vivo解析

嘌呤核苷新型牙槽骨代谢控制机制的体内分析

• 批准号: 20791611
• 负责人: 竹立 匡秀
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20791611/
• 关键词: 骨代謝; アデノシン; CD73; ノックアウトマウス; 骨芽細胞

本研究課題では、プリンヌクレオシドの一つであるアデノシン、(Ado)に着目し、骨代謝制御機構における役割について解析をすすめている。平成20年度の研究成果について下記に報告する。まず、骨芽細胞分化過程におけるAdoの濃度調節因子およびアデノシンレセプター(AdoR)の発現を解析した。マウス前骨芽細胞株MC3T3-E1、を石灰化誘導培地にて培養し、経時的にRNAを採取、Ado産生酵素であるCD73、Ado代謝に関与するアデノシンデアミナーゼ(ADA)及びアデノシンキナーゼ(AK)の両酵素、さらにはAdoRの遺伝子発現を解析した。その結果、CD73、A2aおよびA2bサブタイプAdoRは分化に伴い発現が上昇することが明らかとなった。一方で、ADAならびにAKは分化誘導初期に発現上昇を認めたが、後期にかけて抑制された。これらの結果は骨芽細胞分化誘導に伴い、内因性Adoのシグナルが増強されている可能性を示唆している。さらに内因性Ado産生に関与するCD73分子のin vivoにおける骨代謝への関与を明らかにするために、CD73ノックアウトマウス(以下CD73KO)の骨組織における表現型を解析した。まず、CD73KO及び野生型コントロールマウスから大腿骨、脛骨を採取し、μCT及びpQCTを用いて骨量の解析を行なった。その結果、CD73KOは野生型マウスに比べ、海綿骨、皮質骨において骨量が減少していることが明らかとなった。さらに頭蓋骨からRNAを採取し、骨芽細胞分化マーカーである骨シアロタンパク、オステオポンチン、オステオカルシンの遺伝子発現を解析したところ、CD73KO由来頭蓋骨では野生型に比べ、これら遺伝子発現が有意に低下していることが明らかとなった。以上の結果からCD73分子によって産生された内因性Adoが骨形成において重要な役割を担っていることが示唆された。

This research topic で は, プ リ ン ヌ ク レ オ シ ド の a つ で あ る ア デ ノ シ ン, (Ado) に し, bone metabolism system royal institution に お け る service cut に つ い て parsing を す す め て い る. The research results of the year Heisei 20 に に に て て are recorded below in the に report する. ま ず, bone bud differentiation process に お け る Ado の concentration regulation factor お よ び ア デ ノ シ ン レ セ プ タ ー (AdoR) の 発 now を parsing し た. マ ウ ス bone before bud cell line MC3T3 E1, を calcification induced the petty に て し, 経 に RNA を take, Ado produce enzymes で あ る CD73, Ado metabolic に masato and す る ア デ ノ シ ン デ ア ミ ナ ー ゼ (ADA) and び ア デ ノ シ ン キ ナ ー ゼ (AK) の struck enzyme, さ ら に は AdoR の 伝 son 発 を solution now Analyze the た. そ の results, CD73, both A2a お よ び A2b サ ブ タ イ プ AdoR に は differentiation with い 発 now rising が す る こ と が Ming ら か と な っ た. In the early stage of differentiation induction, に shows an increase in を recognition めたが, and in the later stage, に に けて inhibits された. こ れ ら の results は bone bud differentiation inducing に い, endogenous Ado の シ グ ナ ル が raised strong さ れ て い を る possibility in stopping し て い る. さ ら に endogenous Ado produce に masato and す る の CD73 molecules in vivo に お け る bone metabolism へ の masato Ming ら を か に す る た め に, CD73 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス (hereinafter CD73KO) の bone に お け る phenotype を parsing し た. ま ず, CD73KO and び wild-type コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス か ら femur, tibia を し, mu CT and び pQCT を with い て bone mass line analytical を の な っ た. そ の results, CD73KO は wild-type マ ウ ス に than べ, spongy bone and cortical bone に お い て bone mass が reduce し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. さ ら に skull か ら RNA を take し, bone bud differentiation マ ー カ ー で あ る bone シ ア ロ タ ン パ ク, オ ス テ オ ポ ン チ ン, オ ス テ オ カ ル シ ン の posthumous son 伝 発 now を parsing し た と こ ろ skull of the origins, CD73KO で は wild-type に than べ, こ れ ら posthumous son 伝 発 が now intends to low に し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. の above results か ら CD73 molecular に よ っ て produce さ れ た endogenous Ado が bone formation に お い cut を bear っ て important な service て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

CD73(ecto-5'-nucleotidase)による骨代謝制御機構の解析

CD73（ecto-5-nucleotidase）骨代谢调控机制分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 金谷聡介;根本英二;島内英俊;大原廣之
• 通讯作者: 大原廣之