量子ドット３次元蛍光イメージングと適応型深部光照明による生体深部観察技術の創成

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令和３年度から進めている偏光依存性のある偏光ディレクトフラットレンズおよび偏光回折格子を用いた異軸型共通光路蛍光ディジタルホログラフィーについて研究を進めた。直径10 umまたはそれ以下の蛍光ビーズを用いて同軸型ホログラムの記録に成功しているが，視野全体に均質なホログラムが得られておらず，再構成結果が十分でない。そのため，干渉性の高いレーザー光源を併用して課題解決に取り組んでいる。また，深部照明技術には高速２値位相変調型空間光変調素子を用い，高速３次元光スポットパターンを生成した。高速２値位相変調型空間光変調素子は最高速度5000フレーム毎秒で2048x2048画素の２値位相分布を表示可能である。100個のスポットを作成したときに，スポット強度分布のピーク強度値に対する標準偏差の大きさは15%程度に抑えられることが分かった。研究分担者の湯川は，令和3年度に作製した赤外光によって２光子励起され，バイオイメージングによく用いられる黄色や赤色蛍光タンパク質の蛍光とほぼ同じ波長域に発光中心を持つ量子ドットを用いて，量子ドット近傍にある蛍光タンパク質の劣化画像復元のための高輝度基準光源としての有用性を検証した。また，蛍光性量子ドットと蛍光タンパク質の２光子励起で用いる近赤外光と同じ波長で１光子励起に応答する２種類の量子ドットを作製した。さらに，的場と緊密に連携し，本量子ドットを用いて新規３次元蛍光イメージング技術を元に，深部集光のための高輝度基準光源としての有効性検証を開始できた。的場と玉田は引き続き，コケ植物ヒメツリガネゴケの生細胞に対してより効率的にガラスナノキャピラリーを挿入するための実験系を検討した。また，ヒメツリガネゴケにおける幹細胞運命転換の鍵因子の有力候補を同定した。深部イメージングの対象として，この因子の蛍光タンパク質標識株の作出に着手した。