生物時計が調節する魚類の免疫リズムの解明 ～感染症の防除を目指して～

阐明生物钟调节的鱼类免疫节律 - 旨在控制传染病 -

• 批准号: 20H03064
• 负责人: 河野 智哉
• 金额: $ 11.4万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03064/
• 关键词: 魚類; 免疫; 感染症; 概日リズム; 時計遺伝子; 免疫関連遺伝子

ゲノム編集技術CRISPR / Cas9システムを用いて、時計遺伝子Bmal1およびRORaノックアウト(KO)メダカの作出を試みた。Bmal1-KOメダカの作出においては、ホモ変異個体(F4)の作出に成功した。さらにBmal1-KOメダカの行動を野生型 (WT) メダカと比較したところ、WTメダカの遊泳が緩慢になる夜間 (暗闇) において、KOメダカは活発な遊泳を見せた。また、受精卵から仔魚の発生までにかかる日数がWTと比べBmal1-KOメダカは長いことが分かった。これらは、生理機構のリズムを司る時計遺伝子の破壊による表現型であると考えられる。RORa-KOメダカの作出においては、F3ホモ個体を得るところまでは順調に進んだが、ホモ個体の掛け合わせでは産卵が進まなくなったため、ホモ個体とヘテロ個体を掛け合わせることでホモ個体の増産を進めた。今後はWTとKOメダカにおける発現遺伝子の違いを詳細に検討する予定である。続いて、異なる時刻での病原体感染に対する生体防御能について検討した。LD12:12に馴致したWTメダカを1.0 x 10^5 CFU/ml濃度の病原細菌(Edwardsiella piscicida)液で2時間浸漬感染し、その後の斃死率および体内での菌数変化を調べた。その結果、ZT2感染区における死亡率はZT14感染区と比べ有意に低く、また体内で増殖した細菌数も有意に少ないことが確認された。さらに、ZT2感染区における炎症性サイトカイン (il1b, il6, il8) およびToll様受容体 (tlr5m) の発現はZT14感染区と比べ顕著に増加した。これらのことから、病原体に対する生体防御能は時刻によって異なることが示唆された。

CRISPR / Cas9 is a compilation technique that is used in the production of time-sensitive images. Bmal1-KO Bmal1-KO The number of days when the fertilized egg is born is WT. Bmal1-KO. The phenotype of the physiological organ is different from that of the physiological organ. RORa-KO In the future, WT will discuss in detail the occurrence of the virus. The biological defense capabilities against pathogen infection are constantly being explored at different times. LD12:12: The concentration of pathogenic bacteria (Edwardsiella piscicida) in the solution was 1.0 x 10^5 CFU/ml for 2 hours. The mortality rate after immersion and the number of bacteria in the body were adjusted. The mortality rate in ZT2 infection zone was lower than that in ZT14 infection zone, and the number of bacteria in ZT2 infection zone was lower than that in ZT14 infection zone. The inflammatory cells (il1b, il6, il8) and Toll receptor (tlr 5m) were found in ZT2 infected area and ZT14 infected area. The organism's defense against pathogens is always different.

项目成果

Study on fish cytokines regulating innate immune responses

鱼类细胞因子调节先天免疫反应的研究

• DOI: 10.2331/suisan.wa2820
• 发表时间: 2021
• 期刊: NIPPON SUISAN GAKKAISHI
• 影响因子: 0.4
• 作者: Yoshioka Yuki;Yamashita Hiroshi;Suzuki Go;Shinzato Chuya;Tomoya Kono
• 通讯作者: Tomoya Kono

メダカ(Oryzias latipes)における２つのインターロイキン17受容体C遺伝子の同定およびリガンドとの結合性解析

青鳉 (Oryzias latipes) 中两个白细胞介素 17 受体 C 基因的鉴定及其与配体的结合特性分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 原田七輝;岡村洋;河野智哉;酒井正博;引間順一
• 通讯作者: 引間順一

Evolutional perspective and functional characteristics of interleukin-17 in teleosts

• DOI: 10.1016/j.fsi.2022.108496
• 发表时间: 2022-12-20
• 期刊: FISH & SHELLFISH IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Okamura，Yo;Kono，Tomoya;Hikima，Jun-ichi
• 通讯作者: Hikima，Jun-ichi

メダカにおけるインフラマソーム構成分子の細胞内局在と細胞死誘導

青鳉炎症小体组成分子的细胞内定位和细胞死亡诱导

• 发表时间: 2021
• 作者: 森本和月;坂田篤哉;河野智哉;酒井正博;引間順一
• 通讯作者: 引間順一

概日リズムを有するメダカIL-1bによる免疫制御機構

青鳉IL-1b与昼夜节律的免疫控制机制

• 发表时间: 2023
• 作者: Kanzaki Natsumi;Akiba Mitsuteru;Masuya Hayato;Tsujimoto Satoshi;羽田崇彦・竹内智哉・宮西弘・湯浅拓巳・瀬戸口すずか・武田彩果・森本和月・ 引間順一・酒井正博・河野智哉
• 通讯作者: 羽田崇彦・竹内智哉・宮西弘・湯浅拓巳・瀬戸口すずか・武田彩果・森本和月・ 引間順一・酒井正博・河野智哉