Elucidation of the repair mechanism of neuronal DNA damage in Alzheimer's disease based on the functional recovery of BRCA1

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TauとBRCA1の共凝集を阻害する方法を得るAβによるDNA傷害を凝集tau存在下でも修復する方法を見いだすことを目標とする．その為に以下の4段階の検討を行った．(a) ヒト剖検脳において病理学的，生化学的検討を行いBRCA1と共凝集するtauにアイソフォーム特異性があるかを明らかにした．AD以外のtauopathyの剖検脳においてもBRCA1免疫染色や生化学的解析を行い，tauとともに凝集する現象が見られるかを検討した．これによりBRCA1の機能喪失がAD特異的か他のtauopathy全般的な現象かが検討可能であった．さらに，tauの3R/4Rアイソフォーム別による共凝集の差異が明らかとなった．Pick disease，corticobasal degeneration，progressive supranuclear palsyを用いた少数例での病理学検討ではBRCA1の機能喪失はtauopathy全般に生じている事を想定している(M Kurihara, et al., )．(b) In vitro tau凝集モデルでBRCA1の共凝集に必要なドメインを決定した．細胞モデルにおいてtauは強制発現のみでは凝集はしない．このため，(1)で得られた情報を元にin vitroで特定のtau・アイソフォームを過剰発現した細胞内に凝集を誘発するseedを加え凝集体を出現させる方法論を利用した．そこに既にBRCA1の変異で生じる遺伝性乳癌・卵巣癌症候群において判明している機能ドメインをもとに作成したBRCA1の欠失，変異体を強制発現することで共凝集に必要なドメインを決定した．右図の様に長い領域の欠失変異体を用いた予備的検討ではBRCA1の凝集関連ドメインの存在が示されるため，より細かな変異体作成により正確な部位が決定できた．