The elucidation of mechanisms and the development of novel therapeutic methods for mutant p53-induced EMT in lung cancer

突变p53诱导肺癌EMT的机制阐明和新治疗方法的开发

• 批准号: 20H03770
• 负责人: 毛受 暁史
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03770/
• 关键词: EGFR; p53遺伝子変異; 上皮間葉転換（EMT）; Transgenic mouse; 薬剤スクリーニング; p53変異; RNA-seq; 浸潤転移能; 肺癌; 浸潤転移; 上皮間葉転換; 上皮間葉転換（EMT); 変異p53誘導; 肺癌悪性化; p53; 薬剤耐性; 上皮間葉転換 （EMT); 変異p53; スタチン

2022年度は、p53変異によるEMT活性化の相違を解析することで、EMTがどのよう経路が活性化しているかについて明らかに使用としている。今回、機能亢進型や機能抑制型など様々なタイプの変異型p53ベクターの作成を行い、現在まで合計10種類のHotspot変異型p53ベクターを作成した。それらのベクターによる肺癌細胞株への遺伝子導入を行い、structural type mutationよりもcontact type mutationでEMT活性が亢進していることが確認された。このうち、最もEMT活性化がみられる２種類やEMT活性みられない変異、negative controlの４種類のtransformed cellsをRNA-seq/miRNA-seqを行い、EMT活性化がみられるtypeにおける活性化経路を見出した。またEMTの際に活性化するシグナル経路であるArf6-AMAP1経路とPD-L1発現について解析を進めた。結果、AMAP1発現低下により、negative feedbackと考えられるEGFR経路の活性化が起こり、その結果として、PD-L1発現が上昇することを見出した。次にluciferaseを利用したpromoter reporter assayによるhigh through-put screeningの系を立ち上げ、TGFb誘導性EMT抑制薬として、７種類のcompoundを見出し、そのうち３種類はTGFb受容体阻害剤であり、我々の系の有効性が示され、これを論文化した。この系をEMTを起こす様々な細胞株に応用し、同様の実験を行うことを計画している。またEGFR変異transgenic mouseとp53変異transgenic mouseを入手し、それぞれの遺伝子型を確認して、交配をすすめている。

In 2022, p53 changes caused EMT activation and phase analysis, and EMT was activated and used. Now, hyperfunction type and function inhibition type are selected, and a total of 10 types of Hotspot type are selected. The expression of EMT gene in lung cancer cell lines was confirmed by structural type mutation and contact type mutation. EMT activation pathway was found in two different types of EMT activation pathway, four different types of transformed cells in RNA-seq/miRNA-seq pathway and four different types of EMT activation pathway. EMT is activated at the same time, and the Arf6-AMAP1 circuit and PD-L1 circuit are analyzed. As a result, AMAP1 appears low, negative feedback is observed, EGFR pathway activation is initiated, and PD-L1 appears high. 7 kinds of compounds were found, 3 kinds of compounds were found, 3 kinds of compounds were found, and 3 kinds of compounds were found, and the effects of TGFb receptor inhibitor were shown. The EMT of this system is initiated by the use of cell lines, and by the implementation of the EMT program. EGFR variant transgenic mouse p53 variant transgenic mouse p54 variant transgenic mouse p55 variant

项目成果

High programmed death ligand 1 expression in carcinomatous components predicts a poor prognosis in pulmonary pleomorphic carcinoma

癌成分中程序性死亡配体 1 的高表达预示着肺多形性癌的不良预后

• DOI: 10.1007/s00595-021-02439-7
• 发表时间: 2022
• 期刊: Surgery Today
• 影响因子: 2.5
• 作者: Noguchi Misa;Menju Toshi;Nakajima Naoki;Yoshizawa Akihiko;Ohsumi Akihiro;Nakajima Daisuke;Hamaji Masatsugu;Haga Hironori;Date Hiroshi
• 通讯作者: Date Hiroshi