Mechanismen der Bl-1/Bcl-2-vermittelten Reduktion des ER-Kalziumgehalts und der damit verbundenen antipoptotischen Wirkung

Bl-1/Bcl-2介导的内质网钙含量降低机制及相关抗凋亡作用

• 批准号: 32295278
• 负责人: Professor Dr. Axel Methner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Molekulare Medizin
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/32295278?language=en
• 关键词: Mechanismen; der; Bl; Bcl; vermittelten

Bax inhibitor-1 (BI-1) und Bcl-2 sind evolutionär konservierte Proteine, die in der Lage sind apoptotischen Zelltod zu verhindern. Beide Proteine sind am Phänomen der ischämischen Präkonditionierung beteiligt, kolokalisieren im endoplasmatischen Retikulum (ER) und schützen vor Zelltod durch verschiedenste Stimuli über eine Verminderung des ER-Kalziumgehalts, was sich theoretisch über einen vermehrten Kalziumflux aus dem ER oder verminderten Kalziumtransport in das ER erklären ließe. Physiologischerweise gelangt Kalzium nach Bindung des second messenger Inositoltriphosphat (InsP3) über InsP3-Rezeptoren in das Zytosol und wird dort rasch ATP-abhängig zurück transportiert. Wir konnten in Vorarbeiten zeigen, dass BI-1 und Bcl-2 physikalisch und funktionell miteinander und mit InsP3-Rezeptoren interagieren; BI-1 bindet über seinen N-Terminus an Bcl-2 und eine BI-1- Deletionsmutante, der diese Bindedomäne fehlt, inhibiert den durch Bcl-2 vermittelten Schutz vor Apoptose. Hypothesen dieses Projekts sind: 1) BI-1 und Bcl-2 bilden zusammen mit den InsP3- Rezeptoren einen Komplex und sensibilisieren diesen für niedrige InsP3 Konzentrationen. Dies bewirkt die beobachtete Reduktion des ER-Kalziums. 2) Ein Auseinanderreißen dieses Komplexes inhibiert die zelltodverhindernde Wirkung beider Proteine. Diesen Hypothesen soll durch gezielte Ausschaltung der Komponenten des Komplexes in defizienten Fibroblasten, in primären Neuronenkulturen aus BI-1 KO Mäusen, sowie nach siRNA-vermitteltem knockdown mittels Interaktionsstudien, Kalzium- und Zelltodassays nachgegangen werden. Die Klärung dieses Mechanismus könnte einen Beitrag liefern zum Verständnis der ischämischen Präkonditionierung, sowie neoplastischer oder neurodegenerativer Erkrankungen, die mit einer veränderten Apoptosebalance einhergehen.

Bax inhibitor-1（BI-1）和Bcl-2是一种进化的保守蛋白质，在拉格阶段死亡。由于蛋白质是一种通过对内质网的干扰刺激，使内质网内的钙离子浓度升高，并使钙离子在内质网内迁移的现象，因此，蛋白质是一种通过内质网的钙离子通量或在内质网内的钙离子转运的理论。生理学研究表明，酵母菌在发酵液中与第二信使三磷酸肌醇（InsP 3）结合后，可通过ATP结合进行转运。我们知道，BI-1和Bcl-2在生理上和功能上都有缺陷，并与InsP 3-Rezeptoren相互作用; BI-1与Bcl-2的N端结合，而BI-1- Deletionsmutante，这种结合的感觉，抑制了Bcl-2对Apoptose的抑制作用。假设这些项目是：1）BI-1和Bcl-2与InsP 3- Rezeptoren形成复合物，并对InsP 3敏感。这是对ER-Kalziums的削减。2)一种复杂的蛋白质抑制了蛋白质对蛋白质的影响。该假设是通过在BI-1 KO Mäusen的神经元培养物中分离复合物的方法来实现的，因此可以通过Interaktionsstudien、Kalzium-和Zelltodassays韦尔登进行siRNA-干扰物敲除。Die Klärung dieses Mechanismus könnte einen Beitrag liefern zum Verständnis der ischämischen Präkonditionierung，sowie neoplastischer or der neurodenegenativer Erkrankungen，die mit einer veränderten Apoptosebalance einhergehen.