The novel differentiation method in pluripotent stem cells without using gene introduction or cytokine stimulation.

多能干细胞的新型分化方法,无需使用基因导入或细胞因子刺激。

基本信息

  • 批准号:
    20H04510
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 11.32万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    2020
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2020-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

分化細胞の死細胞片の貪食によってMuse細胞は分化細胞と同じ系列の細胞に分化を開始する。貪食によって分化過程のどのレベルまで進むのかを、single cell RNA sequenceなどの方法を用いて解析した。ヒトMuse細胞に、マウス・ラット由来の心筋(中胚葉系)、神経細胞(外胚葉系)、肝細胞(内胚葉系)由来の死細胞片を貪食させて、それぞれの分化マーカーを初期、中期、後期の分化マーカーに分けて発現の有無をqPCR等で検証し、時系列に従って後期マーカーの発現まで認められた。機能性を評価するために心筋・神経の死細胞片貪食による心筋・神経分化を用いて細胞外のK+濃度を上昇させることによる脱分極と細胞内Ca2+の上昇をGCaMP-Muse細胞で計測した。その結果脱分極によってCa2+が上昇することが分かった。qPCRにおいて機能性獲得と相関するK+, Na+, Ca2+ などのチャンネルの発現も確認された。single cell RNA sequenceで未分化のヒトMuse細胞、マウス由来の心筋細胞の死細胞片を貪食させたヒトMuse細胞、そしてヒトの心筋細胞(AC16)の三者を比較検討した。その結果、心筋死細胞片を貪食したMuse細胞の遺伝子発現パターンは心臓由来の心筋細胞AC16と類似し、未分化Muse細胞とは異なるパターンを取ることがPseudotemporal depiction of heatmap、GO解析、hierarchy heatmap、Monocle trajectoryなどの解析方法で明らかになった。体性幹細胞である間葉系幹細胞(MSC)、神経幹細胞(NSC)では貪食能があることがあり、さらに死細胞片貪食によって、貪食細胞と同じ細胞種に分化した。ただMSCは軟骨、脂肪には分化したが胚葉を超えた分化はしなかった。NSCは神経系にのみ分化した。
Due to the gluttony of dead cell sheets of differentiated cells, Muse cells begin to differentiate into differentiated cells and cells of the same series. The method of single cell RNA sequence analysis is used to analyze the process of gluttony differentiation. The differentiation of Muse cells, neurocytes and hepatocytes is characterized by gluttony and by the presence or absence of qPCR in the early, middle and late stages of differentiation. Functional evaluation: increase in extracellular K+ concentration; depolarization; increase in intracellular Ca2 +; measurement of GCaMP-Muse cells As a result, Ca2 + ions in the solution increased. qPCR is used to confirm the functional acquisition and development of K+, Na+, Ca2 +-related proteins. A comparative study of single cell RNA sequences in undifferentiated Muse cells, in undifferentiated Muse cells, in undifferentiated M The results showed that the gene of Muse cells was found in the same way as that of AC16 cells, which were similar to that of undifferentiated Muse cells, and the analysis methods of Pseudotemporal division of heatmap, GO analysis, hierarchy heatmap, and Monocle trajectory were clear. Somatic stem cells, mesenchymal stem cells (MSC), neurostem cells (NSC), gluttonous cells, and the same cell species differentiate. MSC cartilage, fat differentiation The NSC is divided into two parts: the nervous system.

项目成果

期刊论文数量(59)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Muse cell treatment: Next-generation medical revolution compatible with
Muse 细胞治疗:兼容的下一代医学革命
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Han Yu;Hayato Watanabe;Atsushi Shimojo;Koichi Yokosawa;Mari Dezawa
  • 通讯作者:
    Mari Dezawa
Intravenous injection of human multilineage-differentiating stress-enduring cells alleviates mouse severe acute pancreatitis without immunosuppressants
  • DOI:
    10.1007/s00595-021-02382-7
  • 发表时间:
    2021-10-23
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.5
  • 作者:
    Fukase, Masahiko;Sakata, Naoaki;Dezawa, Mari
  • 通讯作者:
    Dezawa, Mari
生体に備わるMuse細胞の医療変革:アンチエージングへの貢献の可能性
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Han Yu;Hayato Watanabe;Atsushi Shimojo;Koichi Yokosawa;出沢 真理
  • 通讯作者:
    出沢 真理
Muse細胞がもたらす未来の医療
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ryoma Nakao;Hiroaki Kobayashi;Yusuke Iwabuchi;Yusuke Sasaki;Madeleine Ramstedt;Satoru Hirayama;Makoto Ohnishi;出沢 真理
  • 通讯作者:
    出沢 真理
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Eisho Kanemitsu;Xiangdong Zhao;Keiko Iwaisako;Asuka Inoue;Akihide Takeuchi;Shintaro Yagi;Hidetoshi Masumoto;Hiroaki Ohara;Motoyasu Hosokawa;Tomonari Awaya;Junken Aoki;Etsuro Hatano;Shinji Uemoto;Masatoshi Hagiwara;出沢 真理
  • 通讯作者:
    出沢 真理
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    出沢 真理

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