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麹菌の過剰な発酵熱発生のメカニズム解明

米曲霉发酵过度产热机制的阐明

基本信息

批准号：
20J11473
负责人：
渡嘉敷直杏
金额：
$ 1.22万
依托单位：
University of the Ryukyus
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J11473/
关键词：
発酵熱麹

项目摘要

麹は製麹中に必要以上に発熱する。本研究では製麹後期の最高品温状態で発現量が上昇し、発酵熱の生成に関与すると予想された黄麹菌における代替酸化酵素(Aox)の破壊株、過剰発現株を造成し、発熱への関与を調べた。麹品温の温度の差は0.1度程度差の小さなものである事が見込まれた為、安定した製麹が行えるよう調整した上で品温の測定実験を行った。発現量や麹品温の予備的データからAoxA が発熱を生じる要因であり、aoxA 過剰発現株は親株と比べて品温が高まり、aoxA 破壊株では品温が低下するという結果を実験計画段階で想定していたが、これに反して、実際にはaoxA 高発現株では最高品温が親株と比べて低く、aoxA 破壊株では品温が僅かに高い傾向を示した。また、aoxA およびaoxBの双方を過剰発現させた株を造成した場合においてもaoxA 単独高発現と同様のに品温の低下が見られた。aoxA 高発現株が実際に高発現株であるかリアルタイム定量PCRにてRNA転写量の確認を行ったところ、確かにaoxA の転写量が親株と比べて高いことを確認した。また、aoxB 破壊株におけるaoxA 遺伝子の発現量についても調べたところ、親株と比較して米麹製麹中に発現量が低下していた。aoxB とaoxA 間は配列相同性が高いが、挙動の原因を確認できなかった。aoxA の破壊により品温が上昇している為、Aoxは発酵熱への関与は無いことが示唆された。現在、製麹中の遺伝子発現の確認を RNA-Seq にて行い、呼吸鎖や代謝関連遺伝子の発現を中心に解析を行っている。

More heat is needed in the production of koji. In this study, the highest temperature in the late koji production increased, the heat generation was related to the production of Aspergillus flavus, the replacement of acidifying enzyme (Aox) in the breakdown of strains, the production of strains, the heat generation was related to the regulation. The temperature difference of the curve is 0.1 degrees. The temperature difference is small. The temperature difference is stable. The temperature difference is adjusted. The main causes of the occurrence of heat generation in aoxA over-developed plants are higher than that in parent plants, and the temperature of aoxA over-developed plants is lower than that in parent plants. As a result, the occurrence of heat generation in aoxA over-developed plants tends to be higher than that in parent plants, and the temperature of aoxA over-developed plants tends to be higher than that in parent plants. Both aoxA and aoxB have been found to have high temperature and low temperature. AoxA high-yield strains were identified by quantitative PCR. The amount of aoxA gene was lower than that of aoxB gene. aoxB and aoxA are matched with each other, and the reason for the movement is confirmed. The product temperature of AoxA has increased due to the breakdown of AoxA, and the relationship between AoxA and AoxA's fermentation heat has become unclear. Now, the RNA-Seq process for identification of gene expression in production, the respiratory lock process and the central process for analysis of gene expression related to metabolism.