2つのシグナル増幅機構を組み込んだ免疫測定系の創生：高感度とワイドレンジの実現

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臨床診断法にも用いているイムノアッセイの高感度化を目的とし、カスケード反応とレドックスサイクルの2つのシグナル増幅システムをイムノアッセイに融合させた。本年度では、前年度までに確立した研究成果をベースに、シグナル増幅を有する２項目同時検出可能な高感度イムノアッセイの開発を行った。ヤギとヒトイムノグロブリンＧ（IgG）を測定モデルとして採用し、それぞれ、70 pg/mL（470 fmol/L）と1.0 ng/mL（6.6 pmol/L）の検出限界を達成した。しかしこれらの検出限界は単項目測定時と比較し低感度な結果となった。これはイムノアッセイを行う上で使用したリムルスカスケード反応と血液凝固カスケード反応の２つのカスケード反応間の交差反応に対処するために、異なる溶液中でカスケード反応を誘導させたため、これに伴い溶液を二等分する実験ステップが必要なことに起因すると考えられる。交差反応の起きない、もしくは無視できるカスケード反応を選択することにより単項目測定時の感度を保ったまま、二項目同時検出が達成できると考えられる。また、使用するカスケード反応を追加することで測定項目数の増加も期待できる。また、別の高感度イムノアッセイ系として電気化学発光を利用したデジタルイムノアッセイ系の開発も行った。ヤギIgGを測定モデルとして0.7 pg/mL（4.7 fmol/L）の検出限界を達成し、高感度検出が求められる臨床診断等への応用が期待される。