MRNによる相同組換え開始機構の生化学的解析

MRN对同源重组起始机制的生化分析

• 批准号: 19H03157
• 负责人: 古郡 麻子
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19H03157/
• 关键词: DNA修復; DNA二本鎖切断; 相同組換え

ヒトMRE11/RAS50/NBS1（MRN）は放射線や抗がん剤により引き起こされるDNA二本鎖切断の修復に必須の役割を担うヌクレアーゼ複合体である。DNA二本鎖切断が相同組換えにより修復される際、MRNの働きがどのように制御されているか、またMRNと共に働くとされる複数のヌクレアーゼやDNA結合タンパク質がどのように協調的に働いているかは未だ不明な点が多い。本研究ではMRNの働きを起点に相同組換え開始に働くタンパク質群の働きを、主として生化学・生物物理学的手法を用いて明らかにすることを目的とする。本年度はMRNの蛋白質構造におけるRAD50のフックモチーフの機能解析のため、酵母を用いた遺伝学的解析を行なった。また相同組換えで働くRAD51蛋白質を負に制御するとされるFIGNL1蛋白質を精製し、ATPase活性などの生化学的性質を調べるとともにRAD51を始めとした相同組換え蛋白質との相互作用を調べた。またこれまで精製したRAD51蛋白質を制御するメディエーターやアンチリコンビナーゼがRAD51のDNA結合能や組換え活性に及ぼす影響を調べた。また今後、クライオ電顕によるDNA結合蛋白質複合体の構造解析を行うことを目指し、ネガティブ染色による相同組換え蛋白質の電子顕微鏡観察条件検討を行なった。

MRE11/RAS50/NBS1 (MRN) is a radiation-resistant complex that is required for DNA duplex repair. DNA two locks cut together the same group to repair, MRN and MRN together to control, MRN and MRN This study is based on the same set of MRN techniques. This year, MRN protein structure analysis and yeast application analysis were carried out. The same group of RAD51 proteins are negatively regulated, and the same group of RAD51 proteins interact with each other. The DNA binding activity of RAD51 is regulated by the enzyme activity. In the future, the structure analysis of DNA-binding protein complexes was carried out by electron microscopy.

项目成果

Rad50 zinc hook functions as a constitutive dimerization module interchangeable with SMC hinge

Rad50 锌钩用作本构二聚模块，可与 SMC 铰链互换

• DOI: 10.1038/s41467-019-14025-0
• 发表时间: 2020
• 期刊: Nature Communications
• 影响因子: 16.6
• 作者: Tatebe Hisashi;Lim Chew Theng;Konno Hiroki;Shiozaki Kazuhiro;Shinohara Akira;Uchihashi Takayuki;Furukohri Asako
• 通讯作者: Furukohri Asako

Revealing the dynamic structures and functions of human MRE11/RAD50/NBS1 complex working in DNA damage response

揭示人类 MRE11/RAD50/NBS1 复合物在 DNA 损伤反应中的动态结构和功能

• 发表时间: 2020
• 作者: Kisu;Ishigaki;Emoto;Kato;Yamada;Matsubara;Obara;Masugi;Matoba;Adachi;Banno;Saiki;Itagaki;Kawamoto;Iwatani;Nakagawa;Tsuchiya;Sasamura;Urano;Ema;Ogasawara;Aoki;Nakagawa;Shiina;古郡麻子
• 通讯作者: 古郡麻子

DNA二本鎖切断修復で働くMRE11-RAD50-NBS1複合体の動的構造解析

在DNA双链断裂修复中发挥作用的MRE11-RAD50-NBS1复合物的动态结构分析

• 发表时间: 2021
• 作者: Tatebe Hisashi;Lim Chew Theng;Konno Hiroki;Shiozaki Kazuhiro;Shinohara Akira;Uchihashi Takayuki;Furukohri Asako;古郡麻子
• 通讯作者: 古郡麻子

蛋白質複合体の動的構造解析によるDNA二本鎖切断修復機構の解明

通过蛋白质复合物的动态结构分析阐明DNA双链断裂修复机制

• 发表时间: 2020
• 作者: Kisu Iori;Ishigaki Hirohito;Shiina Takashi et al.;古郡麻子
• 通讯作者: 古郡麻子

DNA二本鎖切断修復機構で働くヒトMRN複合体の動的構造解析

在DNA双链断裂修复机制中发挥作用的人类MRN复合物的动态结构分析

• 发表时间: 2019
• 作者: Sekiya T;Mifsud EJ;Ohno M;Nomura N;Sasada M;Fujikura D;Daito T;Shingai M;Ohara Y;Nishimura T;Endo M;Mitsumata R;Ikeda T;Hatanaka H;Kitayama H;Motokawa K;Sobue T;Suzuki S;Itoh Y;Brown LE;Ogasawara K;Kino Y;Kida H;古郡 麻子;古郡 麻子
• 通讯作者: 古郡 麻子