权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

新規スフィンゴ糖脂質プローブの創製による細胞膜ナノドメインの分子基盤解明

通过创建新型鞘糖脂探针阐明细胞膜纳米结构域的分子基础

基本信息

批准号：
19J10858
负责人：
浅野早知
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

二年目は、一年目に開発した光反応性基「セレノフェン-2-イル置換型α-ケトアミド」の特性評価及びスフィンゴ糖脂質プローブへの応用に注力し、以下の研究項目を実施した。1. 新規光反応性基「セレノフェン-2-イル置換型α-ケトアミド」の開発モデル化合物であるα-マンノースアナログを用い、1H NMRを用いた水中におけるケトアミド構造の安定性評価、高速液体クロマトグラフィーを用いた光分解速度の解析を行い、従来型のチオフェン型構造と同等の水中安定性、光安定性を有することを示した。また、コンカナバリンAレクチンを用いたタンパク質親和性を等温滴定型カロリメトリーにより評価したところ、水素結合やファンデルワールス相互作用に基づく特異性の高い相互作用を示し、ケトアミド構造の導入によりタンパク質との親和性を妨げないことが示された。これらの結果を踏まえ、コンカナバリンAの光アフィニティラベル化を行い、標識化効率をSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動により確認したところ、高い標識化効率及び高選択的ラベル化を達成した。以上の結果より、セレノフェン-2-イル置換型α-ケトアミド構造は光反応性基として有用である可能性が示唆された。2. 光親和性GM3プローブの合成と細胞膜におけるラフト親和性タンパク質との光架橋実験一年目に合成した、シアル酸9位アミノ基修飾型GM3骨格並びに、アルキン及び前述の光反応性基を有する光反応性基ユニットを用い、両者をカルバメート結合を介してカップリングし、光親和性GM3プローブの合成を達成した。A549細胞を用いた光架橋、アジド-アルキン環化付加反応によるビオチンタグの導入、ストレプトアビジンカラムを用いたGM3-標的タンパク質複合体のアフィニティ精製、プロテオミクス解析を行い、17種類の親和性タンパク質候補が同定された。

In the past two years, we have developed the characteristic evaluation of the optical reflective base "-2- 1. The new photoreactive base "α-C_2-C_2-C_ For example, in the case of the introduction of A protein, the affinity of the protein is determined by isothermal titration, and in the case of the introduction of a protein, the affinity of the protein is determined by isothermal titration. The results of this study include: 1) identification efficiency, 2) identification efficiency, 3) identification efficiency, 4) identification efficiency, and 4) identification efficiency. The above results show that the structure of α-C_2-C_2-C_2- 2. Synthesis of photoaffinity GM3 protein and cell membrane synthesis of photoaffinity GM3 protein. Synthesis of photoaffinity GM3 protein and photobridging of photoaffinity GM3 protein. Synthesis of photoaffinity GM3 protein and photoaffinity GM3 protein. A549 cells were used for photobridging, for cyclization, for introduction, for selection, for purification, for analysis, and for identification of 17 types of affinity complexes.

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

糖鎖合成への応用を指向した溶解性向上のための保護基の有用性検証

验证保护基团在提高糖链合成溶解度方面的有效性

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sachi Asano;Rita Pal;Hide-Nori Tanaka;Akihiro Imamura;Hideharu Ishida;Kenichi G.N. Suzuki*;Hiromune Ando*(*corresponding author).;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，矢木宏和，加藤晃一，水上大輝，平井剛，安藤弘宗;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，矢木宏和，加藤晃一，水上大輝，平井剛，安藤弘宗;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，水上大輝，平井剛，安藤弘宗;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，安藤弘宗
通讯作者：
浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，安藤弘宗

脂質ラフトの動的構造の理解を指向した光アフィニティプローブの開発

开发光亲和探针以了解脂筏的动态结构

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sachi Asano;Rita Pal;Hide-Nori Tanaka;Akihiro Imamura;Hideharu Ishida;Kenichi G.N. Suzuki*;Hiromune Ando*(*corresponding author).;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，矢木宏和，加藤晃一，水上大輝，平井剛，安藤弘宗;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，矢木宏和，加藤晃一，水上大輝，平井剛，安藤弘宗;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，水上大輝，平井剛，安藤弘宗
通讯作者：
浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，水上大輝，平井剛，安藤弘宗

新規光反応性基「セレノフェン-2-イル置換型α-ケトアミド」を用いた光親和性スフィンゴ糖脂質プローブの開発と細胞膜ラフト親和性相互作用の理解に向けた応用

使用新型光反应基团“硒酚-2-基取代的α-酮酰胺”开发光亲和鞘糖脂探针及其在理解细胞膜筏亲和相互作用方面的应用

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
浅野早知;田中秀則;今村彰宏;石田秀治;矢木宏和;加藤晃一;水上大輝 ;平井剛 ;安藤弘宗
通讯作者：
安藤弘宗

細胞膜ラフト親和性相互作用の理解に向けた光親和性スフィンゴ糖脂質プローブの開発研究

用于理解细胞膜筏亲和相互作用的光亲和鞘糖脂探针的开发研究

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sachi Asano;Rita Pal;Hide-Nori Tanaka;Akihiro Imamura;Hideharu Ishida;Kenichi G.N. Suzuki*;Hiromune Ando*(*corresponding author).;浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，矢木宏和，加藤晃一，水上大輝，平井剛，安藤弘宗
通讯作者：
浅野早知，田中秀則，今村彰宏，石田秀治，矢木宏和，加藤晃一，水上大輝，平井剛，安藤弘宗

p-tert-Butyl Groups Improve the Utility of Aromatic Protecting Groups in Carbohydrate Synthesis