ミトコンドリアＡＤＰ／ＡＴＰ輸送体を標的とする特異的阻害剤の創製とその応用

申請者が見出したAACのシステイン残基を化学修飾する阻害剤であるエポキシシクロヘキセンジオン類（ECHD類）をミトコンドリア内膜に存在するAACに対して高濃度で作用させると、AAC の顕著な凝集が誘導される。この現象は他のAAC阻害剤には見られない興味深い現象であり、AACの作用機構やシステイン残基の生理的意義を解明する上で重要である。よって、AACの凝集誘導のメカニズム解明に取り組んだ。高濃度のECHD類存在下、システイン修飾剤である銅(II)-O-フェナントロリンを作用させると、AACの三量体がかなりの割合で生成することがわかった。したがって、この三量体の生成メカニズムを明らかにすることにより、凝集誘導のメカニズムを解明することに取り組んだ。ECHD類の濃度やインキュベーション時間などの種々の条件下においてスクリーニングを行ったところ、AAC三量体を十分に精製する条件を確立することができた。また、アルキン部位を有するECHD類をAAC三量体に作用させることによって、AAC三量体へタグ分子として蛍光分子を導入することに成功した。AAC三量体を十分に精製する条件を確立し、AAC三量体へのタグ分子の導入に成功したことは、精密ペプチド化学分析を可能にする基礎であり、AACの凝集現象の作用機構の解明やシステイン修飾の生理的意義を明らかにすることの一助を担うと考えられる。

申請者が見出したAACのシステイン残基を化学修飾する阻害剤であるエポキシシクロヘキセンジオン類（ECHD類）をミトコンドリア内膜に存在するAACに対して高濃度で作用させると、AAC の顕著な凝集が誘導される。この現象は他のAAC阻害剤には見られない興味深い現象であり、AACの作用機構やシステイン残基の生理的意義を解明する上で重要である。よって、AACの凝集誘導のメカニズム解明に取り組んだ。高濃度のECHD類存在下、システイン修飾剤である銅(II)-O-フェナントロリンを作用させると、AACの三量体がかなりの割合で生成することがわかった。したがって、この三量体の生成メカニズムを明らかにすることにより、凝集誘導のメカニズムを解明することに取り組んだ。ECHD類の濃度やインキュベーション時間などの種々の条件下においてスクリーニングを行ったところ、AAC三量体を十分に精製する条件を確立することができた。また、アルキン部位を有するECHD類をAAC三量体に作用させることによって、AAC三量体へタグ分子として蛍光分子を導入することに成功した。AAC三量体を十分に精製する条件を確立し、AAC三量体へのタグ分子の導入に成功したことは、精密ペプチド化学分析を可能にする基礎であり、AACの凝集現象の作用機構の解明やシステイン修飾の生理的意義を明らかにすることの一助を担うと考えられる。