权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

蛍光プローブライブラリーを用いた感染症迅速検出蛍光プローブの開発と創薬への展開

利用荧光探针库开发用于快速检测传染病的荧光探针及其在药物发现中的应用

基本信息

批准号：
19J21205
负责人：
藤田恭平
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1.感染症迅速検出蛍光プローブの開発これまでに細菌種や癌細胞・癌組織のグリコシダーゼ活性を分子内スピロ環化反応を基盤とした蛍光プローブ群を開発する事で網羅的に評価し、その迅速診断を可能とする蛍光プローブを見出してきた。昨年度はウイルスへ焦点を置き、SARS-CoV-2由来のプロテアーゼであるMproに着目し、上記の分子内スピロ環化反応を蛍光制御原理とする蛍光プローブの開発戦略を利用して発現系のSARS-CoV-2 Mpro活性をin vitroで高感度に検出可能な蛍光プローブの開発に新たに成功した。今後、これらの分子内スピロ環化反応を基盤とする蛍光プローブ戦略を感染細胞の迅速検出に応用できる可能性が期待される。2.Tetrazine Click反応を用いたFRET型蛍光プローブの細胞内合成一般的に2波長の色素を用いたFRET型プローブは溶解性が乏しく、細胞内への導入が困難である。当教室が開発してきたグルタチオン濃度変化を可逆的かつ定量的に検出可能なプローブQG3.0は、グルタチオン応答性の蛍光団とグルタチオン非応答性の蛍光団からなるプローブであるが、細胞内に導入する際に溶解補助剤が必要であり細胞膜への吸着が問題であった。昨年度は上記の課題を解決すべく、Tetrazine Click反応でFRET型蛍光プローブを細胞内構築する戦略を考え、その検証を行った。具体的には、緑色及び赤色色素に対して、Tz基とTCO基をそれぞれ標識した色素群を合成し、in vitroでClick反応の評価を行ったところ、FRETプローブ自体を構築する色素ペアを見出す事に成功した。一方で、2色素間の化学構造的な長さや角度がFRETプローブのグルタチオン応答性に大きく影響する事も明らかとなった。今後、2色素間の長さや角度を調整する事で細胞内でグルタチオン応答性のFRETプローブを構築する事が期待される。

1. The rapid detection of infectious diseases, the development of bacterial species, cancer cells, cancer tissue, the activity of intracellular enzymes, the development of molecular enzymes, the evaluation of rapid diagnosis, and the discovery of molecular enzymes Last year, SARS-CoV-2 Mpro was successfully developed by using the molecular cyclization reaction and photoinhibition principle described above to detect possible photodegradation of SARS-CoV-2 Mpro in vitro. In the future, the possibility of rapid detection and use of intracellular cyclization in infected cells is expected. 2. Tetrazine Click reaction is used in the intracellular synthesis of FRET-type fluorescent pigments. The solubility of FRET-type fluorescent pigments is poor, and the introduction of intracellular fluorescent pigments is difficult. When the classroom is open, the concentration changes, and the quantitative changes are reversible, it is possible to detect the possible changes in QG3.0. When the classroom is open, it is possible to detect the changes in the concentration of QG3.0. When the classroom is open, it is possible to detect the changes in the concentration of QG3.0. When the classroom is open, it is necessary to detect the changes in the concentration of QG3.0. When the classroom is open, it is necessary to detect the changes in the concentration of QG3.0. When the classroom is open, it is necessary to detect the changes in the concentration of QG3.0. Last year, the problem was solved by Tetrazine Click reaction, and the intracellular structure of FRET was studied and verified. Specifically, green and red pigment pairs, Tz-based TCO groups, pigment synthesis, in vitro, Click on the evaluation, FRET, and self-construction are successful. The length and angle of the chemical structure between the two pigments greatly affect the response of FRET. In the future, the adjustment of the length and angle of the two pigments will lead to the construction of intracellular FRET protein.

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Development of Fluorescent Probes for Glycosidase Activities and Application to Rapid Breast Tumor Specific Fluorescence Imaging

糖苷酶活性荧光探针的开发及其在快速乳腺肿瘤特异性荧光成像中的应用

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kyohhei Fujita;Mako Kamiya;Hiroaki Ueo;Yasuteru Urano
通讯作者：
Yasuteru Urano

糖分解酵素活性検出蛍光プローブ群の開発と悪性及び良性腫瘍特異的蛍光イメージングへの応用

检测糖酵解酶活性的荧光探针的开发及其在恶性和良性肿瘤特异性荧光成像中的应用

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
藤田恭平;神谷真子;吉岡孝房;小笠原輝;上尾裕明;浦野泰照
通讯作者：
浦野泰照

Springer protocols, Live Cell Imaging: Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology), 2274

Springer 方案，活细胞成像：方法和方案（分子生物学方法），2274

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kyohhei Fujita;Mako Kamiya;Yasuteru Urano
通讯作者：
Yasuteru Urano

"Activatable"型蛍光プローブによるがん迅速蛍光イメージング

使用“可激活”荧光探针对癌症进行快速荧光成像

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
ぶんせき
影响因子：
0
作者：
藤田恭平;神谷真子;浦野泰照
通讯作者：
浦野泰照

Development of Fluorescent Probes for Glycosidase Activities and Application to Cancer and Benign Specific Fluorescence Imaging

糖苷酶活性荧光探针的开发及其在癌症和良性特异性荧光成像中的应用

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kyohhei Fujita;Mako Kamiya;Hiroaki Ueo;Yasuteru Urano
通讯作者：
Yasuteru Urano

DOI：
{{ item.doi }}
发表时间：
{{ item.publish_year }}
期刊：
{{ item.journal_name }}
影响因子：
{{ item.factor }}
作者：
{{ item.authors }}
通讯作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

藤田恭平其他文献

カルボジイミド系架橋剤による心室組織ECM由来ハイドロゲルの力学特性の調整

使用碳二亚胺交联剂调节心室组织 ECM 衍生水凝胶的机械性能

DOI：
发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
0
作者：
藤田恭平;馮忠剛;小沢田正;佐藤大介;中村孝夫;白石泰之;梅津光生
通讯作者：
梅津光生

ルブレン/グラファイト界面における電子励起と緩和のダイナミクス

红荧烯/石墨界面的电子激发和弛豫动力学

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
A. Tanabe;T. Hibi;S. Ipponjima;K. Matsumoto;M. Yokoyama;M. Kurihara;N. Hashimoto;T. Nemoto;Koh Yoshida・Akira Inaba Yoshikata Koga;藤田恭平;上羽貴大，寺脇理恵，山田剛司，加藤浩之，宗像利明
通讯作者：
上羽貴大，寺脇理恵，山田剛司，加藤浩之，宗像利明