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ウイルス様粒子（VLP）表面への抗原提示法を用いた次世代型ワクチンの開発

利用病毒样颗粒（VLP）表面抗原呈递方法开发下一代疫苗

基本信息

批准号：
19J21617
负责人：
増田亮津
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、以下の3つの計画に基づき、研究を進めた。(1)ディスプレイ用抗原のカイコでの高効率生産(2)カイコ系統ライブラリーを利用したカイコの組換えタンパク質生産性の差異の原因探索(3)異種タンパク質間の特異的架橋法を用いた抗原提示VLPワクチン作製(1)では、引き続き豚繁殖・呼吸障害症候群ウイルス(PRRSV)のGP5抗原の生産性改善を試みた。GP5のエクトドメインのC末端にプロテインA由来の配列を融合すると分泌発現が向上する知見が得られており、この融合体にさらに架橋用のSpyCatcherを融合しても分泌発現することが確認された。(2)では、豚流行性下痢病ウイルス(PEDV)の三量体化Sタンパク質の比較的発現の高いカイコ系統と低い系統の組換えバキュロウイルス感染時の脂肪体をRNA-seqし、それぞれの系統ごとに非感染時と比べた発現変動遺伝子を抽出した。その結果、発現の高い系統同士でも変動遺伝子はそれほど共通しておらず、系統ごとに異なる要因でタンパク質の生産性の違いが決まっている可能性が示唆された。(3)では、SpyTag-SpyCatcher systemを用いた抗原ディスプレイ法によってノロウイルスVLP上にPEDVのS抗原をディスプレイすることに成功していたため、マウスで免疫実験を行った。その結果、抗原単独投与と比べてもS抗原に対する抗体量はそれほど変わらなかった。これは、土台のノロウイルスVLPの持つエピトープが強く免疫系に認識されている可能性が考えられた。この結果から、抗原とVLPの組み合わせがワクチンとしての効果に重要である可能性が示唆され、今後の抗原提示型ワクチン開発に役立つ知見が得られた。

This research is based on the following three plans and research progress. (1) High-efficiency production of ディスプレイ antigen のカイコでの (2) カイコ system ライブラリーExploring the reasons for the difference in quality and productivity using the したカイコの group replacement えタンパク (3) heterogeneous タンパクThe specific interstitial bridging method is based on the production of VLP ワクチン using the いた antigen prompts (1) では, and the き続ききウイルス (PRRSV) and the productivity improvement of the GP5 antigen are tested. GP5 のエクトドメインのC terminal にプロテインA origin のalignment をfusion するとsecretion 発appear がup する知见がget られており, このfusion body にさらに bridge with のSpyCatcher をfusion しても secretion 発appear することがconfirm された. (2) Comparative comparison of the three-volume system of epidemiological dysentery (PEDV) and PEDV, the combination of high and low system The RNA-seq of fat body in the case of infection and the extraction of fat body in the case of non-infection are better than the results of infection.そのRESULT, 発appearの高いSystem 同士でも変动 remain 伝子はそれほど公しておらず, SYSTEMごIt's different because of the nature of the product and the possibility of it. (3)では、SpyTag-SpyCatcher SystemをUsing PEDV on PEDV using Antigen Antigen Test Method VLPのS antigenをディスプレイすることにsuccessfulしていたため、マウスでimmunization実験を行った. The result of the test was that the antigen was administered alone, and the amount of the antigen and the antibody was measured.これは, turdai のノロウイルスVLP のhold つエピトープがstrong くimmune system にknow されている possibility がtest えられた.このRESULTS から、antigen とVLPの合み合わせがワクチンとしてのeffect にimportantであThe likelihood of the disease being expressed and the antigen-prompting type of disease in the future being determined by the knowledge of the situation.