アプタマー-核酸コンジュゲートの合成と抗がん活性評価

适体-核酸缀合物的合成及抗癌活性评价

• 批准号: 19J22033
• 负责人: 内海 翔平
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J22033/
• 关键词: 核酸医薬; 核酸化学; アプタマー; がん

本研究はがん細胞への標的選択的な送達を目指した核酸医薬の開発を目的として、1)アプタマーと核酸の連結方法を確立し、2)実際にアプタマーによる標的化が機能しているかを評価するものである。本年度では、アプタマー-核酸コンジュゲートの創製を目指し、アプタマーへの薬物の搭載の検討を中心に行った。薬物導入の足掛かりとなるアルキンを含んだヌクレオシドを、アプタマーの3’末端に導入した。また、薬物側にはアジド基を有するリンカーを導入し、アプタマーとクリック反応の条件に付すことで薬物を搭載することができた。反応条件を種々検討した結果、物性の異なる様々な薬物であってもアプタマーに搭載することが可能であった。また、アルキンユニットの導入位置を5’末端や両末端に導入したアプタマーも合成した。これにより、薬物の搭載位置や搭載数を自在にコントロールできることが示唆される結果を得た。アプタマー-薬物複合体が、細胞内で薬物の作用を発揮するためには、薬物が活性のある構造で放出される必要がある。本研究で用いたリンカーには、がん細胞中の条件で切断が可能な、ジスルフィド結合を有するものを用いた。そこで次に、実際に薬物が放出されるかを確認した。合成した複合体を、がん細胞の条件に付した所、予想通りに定量的に切断は進行した。がん細胞中で、抗がん活性を示すことが考えられたため、細胞増殖抑制活性の評価を行った。標的となる前立腺がん細胞であるPC-3細胞に対して、複合体は細胞増殖抑制活性を確かに示した。アプタマーのみを作用させた場合には、細胞の増殖を抑制しなかったことから、設計通りに複合体は細胞内へ入り込んだ後に、がん細胞中の条件でリンカーが切断され、薬物を放出した結果、細胞の増殖を抑えていることが考えられた。本年度の結果は、抗体に代わる薬物の選択的送達法として、アプタマーが利用可能であることを示した。

This study aims to develop a nucleic acid drug based on target selection and delivery, 1) to establish a method for linking nucleic acids, 2) to evaluate the target function in practice. This year, the Center for the Development of Nucleic Acid Products was launched. The content of the article is introduced into the 3 'end of the article. For example, if you want to buy a car, you can buy a car. The conditions are different. The position of introduction is 5 'and the position of introduction is 5' The position of the object and the number of loads are obtained from the results of the test. The structure of the cell-drug complex is essential for the development of intracellular drug activity. The present study uses a combination of the following conditions: This is the first time that we've seen this. The synthesis of the complex, the conditions of the cell, the quantitative separation, Cell growth inhibition activity was evaluated in vitro and in vivo. The target cell line PC-3 cells and the complex showed inhibitory activity against cell proliferation. In the case of cell proliferation inhibition, the design of the complex is to cut off the conditions in the cell, to release the drug, and to inhibit cell proliferation. This year's results show that antibody generation is the most effective way to select a drug.