次世代ボルナウイルスベクターの開発と遺伝子治療への応用

下一代博纳病毒载体的开发及其在基因治疗中的应用

• 批准号: 19J23468
• 负责人: 神田 雄大
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J23468/
• 关键词: ボルナ病ウイルス; ウイルスベクター; リバースジェネティクス; 遺伝子治療

昨年度までの研究で、ボルナ病ウイルス２型（BoDV-2）の核タンパク質がボルナ病ウイルス１型（BoDV-1）の人工合成効率を大幅に向上させることを明らかにしていたが、本年度は、これらの研究成果をまとめ、国際雑誌に発表した。また、若手研究者海外挑戦プログラムを利用してドイツのFriedrich-Loeffler-Institut（FLI）に留学し、BoDV-2の全ゲノム解析と組換えウイルスBoDV-2の人工合成系を確立した。BoDV-2はBoDV-1に近縁なウイルスであるにもかかわらず、強い病原性を有している可能性が示唆されている。これらのウイルスを比較し、ボルナ病ウイルスの病原性メカニズムを明らかにすることで、BoDV-1を基盤とするウイルスベクター（REVec）の安全性の向上に寄与することが期待される。昨年度から継続しているUniversity of Toledoとの共同研究では、BoDV-1のin vitro RNA合成系を確立し、ゲノム複製に伴う末端配列の修飾について、より詳細な解析を実施した。その結果、BoDV-1のゲノム複製がinternal de novo initiationによって開始され、感染細胞内でのゲノム複製と同様に、3'末端の数塩基が複製されないことが確認された。一方、感染細胞内のゲノムRNAは5'末端が一リン酸化されているのに対し、in vitroで合成されたRNAの5'末端は三リン酸化されていることが明らかになった。この結果から、BoDV-1が宿主因子を利用してゲノムRNA5'末端の修飾すること、また、これによって過剰な免疫応答を抑制し、持続感染を成立させている可能性が推測された。

Yesterday's annual ま で の research で, ボ ル ナ disease ウ イ ル ス type 2 (BoDV - 2) の nuclear タ ン パ ク qualitative が ボ ル ナ disease ウ イ ル ス type 1 (BoDV - 1) の synthetic working rate を に sharply upward さ せ る こ と を Ming ら か に し て い た が, this year's は, こ れ ら の research を ま と め, international 雑 tzu に 発 table し た. ま た, researchers abroad if hand pick 戦 プ ロ グ ラ ム を using し て ド イ ツ の Friedrich - Loeffler - Institut study (the FLI agreed) に し, BoDV - 2 の ゲ ノ ム parsing と group in え ウ イ ル ス BoDV - 2 の artificial GeChengXi を establish し た. BoDV - 2 は BoDV - 1 に nearly try な ウ イ ル ス で あ る に も か か わ ら ず, strong い pathogenicity を have し て い が る possibility in stopping さ れ て い る. こ れ ら の ウ イ ル ス を し, ボ ル ナ disease ウ イ ル ス の pathogenicity メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に す る こ と で, を BoDV - 1 base plate と す る ウ イ ル ス ベ ク タ ー (REVec) の security の に send upward す る こ と が expect さ れ る. Yesterday's annual か ら 継 続 し て い る University of Toledo と の joint research で は, の BoDV - 1 in vitro RNA GeChengXi を establishing し, ゲ ノ ム に with う ends with columns の modified に つ い て, よ り detailed analytical を な be applied し た. そ の results, the BoDV - 1 の ゲ ノ ム copy が internal DE novo initiation に よ っ て began さ れ, infection cell で の ゲ ノ ム copy と with others に, 3 'end の several salt base が copy さ れ な い こ と が confirm さ れ た. Party, within infected cells の ゲ ノ ム RNA は 5 'end が a リ ン acidification さ れ て い る の に し polices, the in vitro で synthetic さ れ た RNA の 5' end は three リ ン acidification さ れ て い る こ と が Ming ら か に な っ た. こ の results か ら が host factors, BoDV - 1 を using し て ゲ ノ ム RNA5 'end の modified す る こ と, ま た, こ れ に よ っ て before turning な immune 応 answer を し, hold 続 established infection を さ せ て い る possibility が speculation さ れ た.

项目成果

Back-primingによるボルナ病ウイルスのゲノム3’末端配列の多様化とゲノム複製効率への影響

反向引发博尔纳病病毒基因组3末端序列的多样化及其对基因组复制效率的影响

• 发表时间: 2020
• 作者: 神田雄大;堀江真行;小松弓子;朝長啓造
• 通讯作者: 朝長啓造

ボルナ病ウイルスのゲノム末端配列がウイルスRNAの複製に与える影響

博尔纳病病毒基因组末端序列对病毒RNA复制的影响

• 发表时间: 2019
• 作者: 神田雄大;堀江真行;小松弓子;朝長啓造
• 通讯作者: 朝長啓造

University of Toledo(米国)

托莱多大学（美国）

ボルナ病ウイルスXタンパク質がウイルス感染サイクルに与える影響の解明

阐明博尔纳病病毒X蛋白对病毒感染周期的影响

• 发表时间: 2021
• 作者: 神田雄大;小森園亮;牧野晶子;朝長啓造
• 通讯作者: 朝長啓造

The Borna Disease Virus 2 (BoDV-2) Nucleoprotein Is a Conspecific Protein That Enhances BoDV-1 RNA-Dependent RNA Polymerase Activity

• DOI: 10.1128/jvi.00936-21
• 发表时间: 2021-11-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Kanda, Takehiro;Horie, Masayuki;Tomonaga, Keizo
• 通讯作者: Tomonaga, Keizo