環境指標生物オオミジンコに対する内分泌撹乱物質の簡易スクリーニング系の開発

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オオミジンコは化学物質に対する感受性が高く、化学物質の内分泌撹乱性・毒性の指標として繁殖試験(脱皮回数、産仔数、仔虫の性比)が採用されている。この手法は化学物質の個体への影響を直接的に判別する手法であるが、非常に煩雑で熟練の技術が必要であり、供試のためのオオミジンコの前培養期間を含めると、3週間から1ヶ月程度と長い時間を要する。また、実施可能な研究機関が限定されているのが現状である。本研究ではオオミジンコに対する内分泌撹乱物質の標的であり、繁殖に重要な脱皮ホルモン受容体(EcR-USP)および幼若ホルモン受容体(Met)を発現する遺伝子組換え酵母を作製し、環境試料中のそれぞれの受容体のリガンド物質を簡便・迅速(2 日)・安価に検出できるレポーターアッセイ系を創出した。また、これらの酵母株を実際にため池の水などの環境試料のアッセイに用い、酵母レポーターアッセイでリガンド物質の検出が可能であることを示した。今年度は、昨年度に新たに同定したオオミジンコ生体内でのMetの新規応答配列２種について、　Metの結合配列E-box (CACGTG)への変異導入や、E-boxを含む配列の長さを変化させることにより、それらの特性について詳細な解析を試みた。また、当初の計画にはなかったものの、昨年度から着手したUSP発現酵母株の作製に関しても、様々な化学物質のアッセイを行い、これまで知られていなかったUSPのアゴニスト・アンタゴニストを同定した。