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きのこβ-1,6-グルカンを認識する新規受容体の同定

识别蘑菇 β-1,6-葡聚糖的新型受体的鉴定

基本信息

批准号：
19K06166
负责人：
金野尚武
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Utsunomiya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K06166/
关键词：
β-グルカン免疫賦活きのこ多糖機能性食品 βーグルカン βグルカン

项目摘要

これまでのマクロファージ様細胞（RAW264.7）を用いた細胞試験から、β-1,6-グルカンはβ-1,3-グルカンよりも高い免疫賦活機能を持つ可能性が示唆された。実際にイワタケ熱水抽出物（主にβ-1,6グルカンを含む）が海藻由来のラミナリン（β-1,3グルカンを含む）よりも高いTNFαの発現を示した。しかしながら、イワタケ由来のβ-1,6-グルカンは水への溶解性が低くゲル化しやすい傾向が認められ、カラムでの分離や各種試験に用いることも困難であった。そこで、担子菌（Coprinopsis cinerea）由来のβ-1,6-グルカナーゼを、麹菌を用いて異種発現することで組み換え酵素を取得し、本酵素でイワタケ熱水抽出物を処理することで低分子化することにした。本酵素は、β-1,6-グルカンに高い基質特異性をもち、高分子を分解する一方で、オリゴ糖への活性は低いという特徴をもつ。これらのことから、イワタケ由来β-1,6-グルカンを基質に用いて酵素分解させることで、各重合度のβ-1,6-グルカンオリゴ糖を調製することができた。酵素分解生成物をサイズ排除クロマトグラフィーを用いて分子量ごとに分画した。これらの糖サンプルにおける免疫賦活機能を評価したところ、分離したオリゴ糖が、酵素分解前の多糖よりも高い活性を示した。質量分析を行ったところ、活性の高いフラクションには5糖、6糖、7糖が主に含まれることが明らかになった。また、アルカリ処理による不純物や官能基の除去を行ったところ、免疫賦活性が低下した。これは脱アセチル化により水素結合が強化し、溶解性が低下した影響であると考えられた。以上のことから、免疫賦活機能には、β-1,6-グルカンオリゴ糖の重合度、純度、溶解性が重要であることが示唆された。

The cell line RAW264.7 was used to test the β-1,6-cell line β-1,3-cell line and to demonstrate the possibility of maintaining high immune activation. In practice, hot water extract (mainly β-1,6-triol), algae origin (β-1,3-triol) and high TNFα production are shown. The β-1,6-trimer has a low solubility in water, a tendency to recognize and isolate, and difficulties in various tests.β-1,6-disidiomycetes, Aspergillus spp., Heterogeneous production, enzyme production, treatment of hot water extract The enzyme has high substrate specificity, high polymer decomposition activity, and low carbohydrate activity. The β-1,6-glucuronidase was used to decompose the β-1,6-glucuronidase in the matrix, and the β-1,6-glucuronidase was used to modulate the β-1,6-glucuronidase in each overlap degree. Enzyme decomposition products are excluded. The immune activation function of the polysaccharide was evaluated, and the polysaccharide activity before enzyme decomposition was demonstrated. Quality analysis: high activity, high purity, high Impurities and functional groups were removed from the cells and the immune activity was decreased. The water element binding is strengthened and the solubility is reduced. The above mentioned factors are important for the immune activation function, β-1,6-glucagon consistency, purity and solubility.

项目成果

期刊论文数量（13）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

水環境下における多糖類の酵素分解

水环境中多糖的酶降解

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
鈴木昌樹;宮内輝久，平林靖，伊佐治信一，長縄竜一;金野尚武
通讯作者：
金野尚武

Screening of a Lentinula edodes Mutant That Retains Lentinan Contents Long after Being Harvested Using TILLING

DOI：
10.1021/acsagscitech.0c00023
发表时间：
2021-02
期刊：
影响因子：
0
作者：
Y. Sakamoto;Shiho Sato;Keiko Nakade;Miyuki Ito;Takahiro Yamauchi;Katsumasa Eda;F. Goto;M. Mizuno;Naotake Konno
通讯作者：
Y. Sakamoto;Shiho Sato;Keiko Nakade;Miyuki Ito;Takahiro Yamauchi;Katsumasa Eda;F. Goto;M. Mizuno;Naotake Konno

真菌類由来β-1,6-グルカンを活用した機能性素材開発

使用真菌来源的β-1,6-葡聚糖开发功能材料