Charakterisierung alternativer LFA-1 Liganden bei entzündlicher und atherogener Zellrekrutierung

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In diesem Teilprojekt sollen die endothelialen Adhäsionsmoleküle JAM-A und Del-1 als neue, alternative LFA-1 Liganden umfassend charakterisiert werden. Zunächst wird die Rolle von endothelialem und thrombozytärem JAM-A im Kontext der Diät-induzierten Atherosklerose in Apoe-defizienten Mäusen untersucht, um umfangreiche Kenntnisse über die vielseitigen Funktionen von JAM-A in verschiedenen Zelltypen zu gewinnnen. Zudem wird die Dynamik der arteriellen JAM-A Expression und Präsentation nach atherogener Stimulation und während der Atherogenese mittels Zweiphotonenmikroskopie verfolgt. Da verschiedene Studien zeigen, dass JAM-A die Expression und Lokalisation von b1 und b3 Integrinen reguliert, wird mittels biochemischen und zellbiologischen Messverfahren untersucht, ob JAM-A auch die Affinität und das clustering diverser leukozytärer Integrinen beeinflussen kann. Des Weiteren ist eine detaillierte Charakterisierung der LFA-1–Del-1 Interaktion geplant. Ein besonderer Fokus besteht hinsichtlich der Frage, auf welche Weise Del-1 die Bindung von LFA-1 an seine kanonischen/ bekannten Liganden und damit die Leukozytenadhäsion moduliert. Die anti-entzündlichen Mechanismen von Del-1 und die Möglichkeit der Interaktion mit Mac-1 werden mit biochemischen und zellbiologischen Methoden und mittels Rasterkraftmikroskopie weiter aufgeklärt. Schließlich soll untersucht werden, ob das Del-1 Homolog MFG-E8 (Laktadherin) als neuer Ligand für LFA-1 und andere leukozytäre Integrine fungieren kann. Eine Rolle dieser neuen LFA-1 Liganden in der Entzündung und der Atherogenese in vivo wird mittels rekombinanter Proteine und in Modellen der Leukozytenrekrutierung und Atherosklerose überprüft. Insgesamt lassen sich somit wichtige Erkenntnisse über die zentrale Funktion von leukozytären Integrinen wie LFA-1 und über die Mechanismen der entzündlichen und atherogenen Leukozytenrekrutierung erwarten