Das Selenoproteom des Malaria-Erregers Plasmodium falciparum

疟疾病原体恶性疟原虫的硒蛋白质组

• 批准号: 35551341
• 负责人: Professorin Dr. Katja Becker
• 金额: --
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/35551341?language=en
• 关键词: Das; Selenoproteom; des; Malaria; Erregers

Viele Selenocystein-haltige Proteine sind redox-aktiv, besitzen verglichen mit ihren Cystein-haltigen Orthologen eine höhere katalytische Aktivität und sind besonders reaktiv gegenüber elektrophilen Inhibitoren. Vor kurzem haben wir in Kooperation mit Vadim Gladyshev, Lincoln, USA, mittels in s/7/co-Analysen die Gene von vier putativen Selenoproteinen sowie die Gene für eine komplette Selenoproteinsynthese-Maschinerie in dem Malariaerreger identifiziert. Erste PCRAnalysen und immunologische Daten bestätigen diese Ergebnisse. Die vier Selenoproteine weisen keine signifikante Sequenzhomologie zu bekannten Proteinen auf und sind P/asmod/e/7-spezifisch. Dies deutet darauf hin, dass sich das Selenoproteom von Malariaparasiten unabhängig von anderen Organismen entwickelt hat und einzigartige Reaktionen katalysiert. Im Rahmen des hier beantragten Projektes sollen die Gene der vier Selenoproteine Moniert und als Cystein-Mutanten sowie als Selenocystein-haltige Proteine exprimiert werden. Mittels GFP-Fusionskonstrukten, enzymatischer Assays und pull down Assays sollen die Proteine in Bezug auf ihre Lokalisation sowie mechanistisch und funktioneil charakterisiert werden. Die in vivo Funktion der Selenoproteine sowie ihre Eignung als drug targets soll mittels gene knock owf-Experimenten und quantitativer real-time PCR untersucht werden.

许多硒半胱氨酸蛋白都具有氧化还原活性，但它与半胱氨酸同源物具有催化活性，因此具有良好的亲电抑制作用。我们与美国林肯的Vadim Gladyshev合作，对一种复杂的硒蛋白合成机制进行了硒蛋白基因的分析。第一个PCR分析和免疫学数据最好是这个结果。维耶硒蛋白没有意义的序列学方法来确定蛋白质和P/asmod/e/7-特异性。第二天，疟疾寄生虫的硒蛋白不能被其他组织吸收，并被分解。本文通过对硒蛋白基因的检测和半胱氨酸突变体对硒半胱氨酸蛋白表达的影响进行了研究。用GFP-融合蛋白构建物、酶法和下拉法可使蛋白质定位于其所具有的机制和功能特性。硒蛋白作为药物靶点的体内功能研究采用固相基因敲除法，通过实时荧光定量PCR方法进行。